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等溫核酸試劑盒
RNA試劑盒使用方法
使用時一定要根據(jù)自己的實驗需要購買提取試劑盒, 如果不是試劑盒,或許能提出RNA,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,會影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護分析等后續(xù)實驗的結果。
當前提取效果好的是QIANGEN公司生產(chǎn)的RNA提取試劑盒,但其售價較高,單次實驗費用花費太大,對精度要求不高的實驗沒有必要購買,當然還有其它的進口試劑盒,但是均存在價格高、訂貨周期長的問題(如果碰上國內(nèi)無貨的時候,要從國外發(fā)貨,會等很長一段時間)。普通的提取實驗用國產(chǎn)的試劑盒就足以,價格不高,基本上各地均有現(xiàn)貨,如天根(目前國內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中銷售面比較廣的一種)等,其價格比進口試劑盒要便宜許多,且效果還不錯,還可以。
當然,就RNA的提取而言,不一定試劑盒的提取效果就非常好,其實采用一些經(jīng)典的RNA提取方法,效果也很不錯,如:TRIZOL、EDTA等,只是試劑盒使用方便,經(jīng)典的方法操作復雜一些。
核酸試劑盒
核酸檢測試劑盒為什么會出現(xiàn)漏檢?
大家在新聞上看到過核酸檢測出現(xiàn)漏檢的現(xiàn)象,這是為什么呢?首先,我們對病毒認識不足,疾病進展目前都不清楚,這就可能導致采樣時間不合適,從而漏檢。第二,每個人的抵抗力不同,同樣都有了病毒,但有的人能快速地清除病毒,體內(nèi)病毒量少,自然不易檢出。第三,試劑盒有自身的靈敏度限制,也就是說樣本中的病毒量少到一定程度,試劑盒是檢測不出來的,這是核酸檢測技術上的限制,另外,樣本采集是否規(guī)范、轉運保存是否恰當?shù)纫蛩囟紩绊懺噭┖械年栃詸z出率。
數(shù)字PCR法和熒光PCR法的關鍵區(qū)別在于檢測結果的定量和相對定量差異。據(jù)了解,現(xiàn)階段數(shù)字PCR試劑和機器相價格加高(一臺儀器近百萬元),在SARS-CoV-2快速檢測中的優(yōu)勢并不大。
不過,由于具備自動化程度更好、耗時更短等技術優(yōu)勢,國內(nèi)多家掌握了數(shù)字PCR技術的核酸試劑研發(fā)企業(yè)正在嘗試開發(fā)適用于SARS-CoV-2檢測的相關試劑盒。