等溫核酸試劑盒分類

目前新的等溫?cái)U(kuò)增檢測技術(shù)。以此為基礎(chǔ)的TwistAmp? 核酸擴(kuò)增產(chǎn)品，能夠在15分鐘內(nèi)進(jìn)行常溫下的單分子核酸檢測。該技術(shù)對硬件設(shè)備的要求很低，特別適合用于體外診斷、獸醫(yī)、食品安全、生物防御和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。常規(guī)PCR必須經(jīng)過變性、退火、延伸三個(gè)步驟，而PCR儀本質(zhì)上就是一個(gè)控制溫度升降的設(shè)備。RPA反應(yīng)的適宜溫度在37°C - 42°C之間，無需變性，在常溫下即可進(jìn)行。這無疑能大大加快PCR的速度。

等溫核酸試劑盒

RNA試劑盒使用方法

使用時(shí)一定要根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要購買提取試劑盒， 如果不是試劑盒，或許能提出RNA，但不能確保其質(zhì)量以及完整性，會(huì)影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護(hù)分析等后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。

當(dāng)前提取效果好的是QIANGEN公司生產(chǎn)的RNA提取試劑盒，但其售價(jià)較高，單次實(shí)驗(yàn)費(fèi)用花費(fèi)太大，對精度要求不高的實(shí)驗(yàn)沒有必要購買，當(dāng)然還有其它的進(jìn)口試劑盒，但是均存在價(jià)格高、訂貨周期長的問題（如果碰上國內(nèi)無貨的時(shí)候，要從國外發(fā)貨，會(huì)等很長一段時(shí)間）。普通的提取實(shí)驗(yàn)用國產(chǎn)的試劑盒就足以，價(jià)格不高，基本上各地均有現(xiàn)貨，如天根（目前國內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中銷售面比較廣的一種）等，其價(jià)格比進(jìn)口試劑盒要便宜許多，且效果還不錯(cuò)，還可以。

當(dāng)然，就RNA的提取而言，不一定試劑盒的提取效果就非常好，其實(shí)采用一些經(jīng)典的RNA提取方法，效果也很不錯(cuò)，如：TRIZOL、EDTA等，只是試劑盒使用方便，經(jīng)典的方法操作復(fù)雜一些。

RPA不受場地的限制，不需要昂貴儀器，對溫度要求低，恒溫?cái)U(kuò)增，時(shí)間短，可以在資源匱乏地區(qū)實(shí)現(xiàn)快速檢測的目的，目前已廣泛用于食品安全及動(dòng)物疫病檢測，但國內(nèi)就PRA技術(shù)在禽病病原檢測中的研究并不多。未來RPA技術(shù)可能在以下方面進(jìn)一步突破：①研發(fā)專門引物設(shè)計(jì)軟件，降低引物設(shè)計(jì)難度。②反應(yīng)溫度范圍拓寬，不局限于某一溫度，可在某溫度范圍內(nèi)完成擴(kuò)增反應(yīng)。③實(shí)現(xiàn)多重檢測，結(jié)果判定更簡便直觀。④可擴(kuò)增長片段核酸。⑤研發(fā)出低廉的酶制劑，降低成本。相信隨著技術(shù)不斷進(jìn)步，勢會(huì)引起一場核酸檢測的革命，取代PCR技術(shù)在分子檢測中的霸主地位，在禽病病原的現(xiàn)場檢測中發(fā)揮更大的作用。