熒光顯微鏡概述

反光鏡

反光鏡的反光層一般是鍍鋁的，因為鋁對紫外光和可見光的藍(lán)紫區(qū)吸收少，反射達(dá)90%以上，而銀的反射只有70%;一般使用平面反光鏡。

目鏡

在熒光顯微鏡中多用低倍目鏡，如5×和6.3×。過去多用單筒目鏡，因為其亮度比雙筒目鏡高一倍以上，但研究型熒光顯微鏡多用雙筒目鏡，觀察很方便。

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熒光顯微鏡的標(biāo)本制作要求

1、載玻片

載玻片厚度應(yīng)在0.8~1.2mm之間，太厚的坡片， 一方面光吸收多，另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚集。載玻片必須光潔，厚度均勻，無明顯自發(fā)熒光。有時需用石英玻璃載玻片。

2、蓋玻片

蓋玻片厚度在0.17mm左右，光潔。為了加強激發(fā)光 ，也可用干涉蓋玻片，這是一種表面鍍有若干層對不同波長的光起到不同干涉作用的物質(zhì)(如氟化鎂)的蓋玻片，它可以使熒光順利通過，而反射激發(fā)光，這種反射的激發(fā)光可激發(fā)標(biāo)本。

3、標(biāo)本

組織切片或其他標(biāo)本不能太厚，若太厚激發(fā)光大部分消耗在標(biāo)本下部，而物鏡直接觀察到的上部不充分激發(fā)。另外，細(xì)胞重疊或雜質(zhì)掩蓋，影響判斷。

4、封裱劑

封裱劑常用甘油，必須無自發(fā)熒光，無色透明，熒光的亮度在pH8.5~9.5時較亮，不易很快褪去 。

5、鏡油

一般暗視野熒光顯微鏡和用油鏡觀察標(biāo)本時，必須使用鏡油，盡量使用無熒光鏡油，也可用上述甘油代替，液體石蠟也可用，只是折光率較低，對圖像質(zhì)量略有影響。

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熒光顯微鏡的原理

熒光顯微鏡是一種較為常用的的光學(xué)顯微鏡，其基本原理是利用一定波長的激發(fā)光對樣品進(jìn)行激發(fā)，使之產(chǎn)生一定波長的熒光，從而用于對樣品結(jié)構(gòu)或其組分進(jìn)行定性、定位、定量觀察檢測。

熒光顯微鏡是用短波長的光線照射用熒光素染色過的被檢物體，使之受激發(fā)后而產(chǎn)生長波長的熒光，然后觀察。熒光顯微鏡廣泛應(yīng)用于生物，醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。

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