熒光分光光度計(jì)種類

熒光光譜法具有靈敏度高、選擇性強(qiáng)、用樣量少、方法簡(jiǎn)便、工作曲線線形范圍寬等優(yōu)點(diǎn)，可以廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)和藥理學(xué)、有機(jī)和無機(jī)化學(xué)等領(lǐng)域。熒光分光光度計(jì)的發(fā)展經(jīng)歷了手控式熒光分光光度計(jì)，自動(dòng)記錄式熒光分光光度計(jì)，計(jì)算機(jī)控制式熒光分光光度計(jì)三個(gè)階段；熒光分光光度計(jì)還可分為單光束式熒光分光光度計(jì)和雙光束式熒光分光光度計(jì)兩大系列。其他的還有低溫激光Sh p ol’skill熒光分光光度計(jì)，配有壽命和相分辨測(cè)定的熒光分光光度計(jì)等。

熒光光譜

1852年Stokes在考察奎寧和葉綠素的熒光時(shí)，用分光計(jì)觀察到熒光波長(zhǎng)比入射光波長(zhǎng)稍長(zhǎng)些。經(jīng)過判明，這種現(xiàn)象不是由光的漫射作用引起的，而是這些物質(zhì)在吸收光能后重新出的不同波長(zhǎng)的光。因此，他引入熒光是光發(fā)射的概念。熒光光譜先要知道熒光，熒光是物質(zhì)吸收電磁輻射后受到激發(fā)，受激發(fā)原子或分子在去激發(fā)過程中再發(fā)射波長(zhǎng)與激發(fā)輻射波長(zhǎng)相同或不同的輻射。當(dāng)激發(fā)光源停止輻照試樣以后，再發(fā)射過程立刻停止，這種再發(fā)射的光稱為熒光。

熒光淬滅

熒光物質(zhì)的發(fā)射光譜與其吸收光譜呈現(xiàn)重疊，便可能發(fā)生所發(fā)射的熒光被部分再吸收的現(xiàn)象，導(dǎo)致熒光強(qiáng)度下降。溶液濃度增大時(shí)會(huì)促使再吸收現(xiàn)象加劇。

當(dāng)然，熒光強(qiáng)度的影響因素還有溶劑、溫度、pH值、散射光等，在定量分析中需要加以考慮。

熒光光譜定量分析的計(jì)算與其他光譜類似，包括標(biāo)準(zhǔn)曲線法、比例法等。

熒光物質(zhì)分子與溶劑分子或其他溶質(zhì)分子相互作用引起熒光強(qiáng)度降低的現(xiàn)象就是熒光淬滅。引起熒光淬滅的物質(zhì)稱為熒光淬滅劑，如鹵素離子、重金屬離子、氧分子、硝基化合物、重氮化合物、羰基、羧基化合物等。熒光淬滅的主要形式有：碰撞淬滅（的）、靜態(tài)淬滅、轉(zhuǎn)入三重態(tài)淬滅、發(fā)生電荷轉(zhuǎn)移反應(yīng)的淬滅、自淬滅。

基于熒光物質(zhì)所發(fā)出的熒光被分析物淬滅，隨著被分析物濃度增加，溶液的熒光強(qiáng)度降低，建立了熒光淬滅法?？梢杂脕肀O(jiān)控溶液中的微量氧、某些無機(jī)化合物的測(cè)定等。

原子熒光光譜儀

原子熒光光度計(jì)利用惰性氣體氣作載氣，將氣態(tài)氫化物和過量氫氣與載氣混合后，導(dǎo)入加熱的原子化裝置，氫氣和氣在火焰裝置中燃燒加熱，氫化物受熱以后迅速分解，被測(cè)元素離解為基態(tài)原子蒸氣，其基態(tài)原子的量比單純加熱、銻、鉍、錫、硒、碲、鉛、鍺等元素生成的基態(tài)原子高幾個(gè)數(shù)量級(jí)。原子熒光分析儀分非色散型原子熒光分析儀與色散型原子熒光分析儀。這兩類儀器的結(jié)構(gòu)基本相似，差別在于單色器部分。