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PCR實驗室建設方案
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6、應配備足夠的固定電源插座,避免多臺設備使用共同的電源插座。應有可靠的接地系統(tǒng),應在關鍵節(jié)點安裝漏電保護裝置或監(jiān)測報警裝置。
7、實驗室臺(桌)柜和座椅等應穩(wěn)固和堅固,邊角應圓滑。實驗臺面應防水,并能耐受熱、酸堿、消毒劑及其他化學劑。一般采用環(huán)氧樹脂臺面。
8、實驗臺中的櫥柜和實驗臺應牢固,實驗臺、柜和其他設備之間應保持一定距離,以便清潔。
9、實驗室門為凈化門,應有可視窗并帶自動閉門器,實驗室的門與門不能相對開啟,必須錯位開啟。并達到適當?shù)姆阑鸬燃墸T鎖及門的開啟方向應不妨礙室內人員逃生。
10、實驗室應設洗手池,水龍頭開關宜為非手動式,宜設置在靠近出口處。
11、給水管道應設置倒流防止器或其他有效的防止回流的裝置;給排水系統(tǒng)應不滲漏,下水應有防回流設計。
12、應配備適用的應急器材,如消防器材、意外事故處理器材、急救器材等。
13、應配備適用的通訊設備。
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防止實驗污染都有哪些措施?
對于低流行地區(qū),PCR檢測人員經(jīng)過嚴格培訓上崗后,核酸污染的風險相對較小,但在疫區(qū)超負荷工作時,就可能會遇到核酸污染的問題,可通過以下措施降低污染機會:
1.正確佩戴手套:手套未緊密貼合拇指、食指和中指,在進行開蓋操作時容易發(fā)生交叉污染。
2.正確使用生物安全柜:簡單、整潔、避免通風口堵塞;操作前后紫外線照射,消毒劑隨手可及;廢液缸里有1/3體積的含氯消毒液,并且及時清理廢液缸,保證廢物不超過廢液缸體積的2/3。
3.核酸提取儀去污染:每天多批次檢測時,在每一批次檢測完以后必須用75%的乙醇和核酸去除劑對儀器進行去污染。
4.重視通風:不定期對房間進行通風,每次至少持續(xù)30min。
5.PCR擴增區(qū)去污染:PCR反應管必須蓋緊,避免擴增后的核酸對環(huán)境的污染。
6.實驗室隨手可及的消毒劑。
PCR實驗結果中有曲線出現(xiàn)末尾起跳但是沒有完整擴增的現(xiàn)象。
原因分析:
(1)陰參曲線末尾起跳,通常表示存在污染;
(2)復檢樣本,排除非特異性擴增的可能性;
(3)正常樣本也可存在曲線末尾起跳,表示樣本濃度低或者加樣量不準確。
解決方案:排除是否存在污染;排除污染原因后復檢樣本,如果復檢后曲線為陰性直線則說明之前的末尾起跳為非特異性擴增,如果復檢后曲線仍與之致則說明末尾起跳表示該樣本中待檢病毒核酸的濃度偏低。
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PCR實驗室設計裝修經(jīng)驗補充
①試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入,造成污染;可以通過控制進風風量大于排風風量達到正壓效果。
②核酸擴增室及產物分析室應呈微負壓,以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品,可以通過控制排風風量大于進風風量達到負壓效果。
③在理想情況下,PCR實驗室緩沖間內,可設置正壓,使室內空氣不流向室外,室外空氣不流向室內。PCR實驗室進風由原有中央空調控制,要求將中央空調風口安裝到一定的,且高度為地面鋪裝好后2600mm處。
④如果使用熒光PCR儀,擴增室和產物分析室可以合并。若房間進深允許,可設PCR內部走廊。需要指出的是在減少室內外空氣交換方面,緩沖間比走廊更有意義。