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實驗室設(shè)計建設(shè)
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PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的簡稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù),可看作生物體外的特殊DNA粘貼。通過DNA基因系統(tǒng),能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量,其精que度高達(dá)納米級別,檢測相關(guān)病du在患者體內(nèi)存在的數(shù)量、是否粘貼、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷適合使用哪類抗病毒的藥、判斷藥如何、給臨床整治提供了可靠的檢驗依據(jù)。
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防止實驗污染都有哪些措施?
對于低流行地區(qū),PCR檢測人員經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)上崗后,核酸污染的風(fēng)險相對較小,但在疫區(qū)超負(fù)荷工作時,就可能會遇到核酸污染的問題,可通過以下措施降低污染機會:
1.正確佩戴手套:手套未緊密貼合拇指、食指和中指,在進(jìn)行開蓋操作時容易發(fā)生交叉污染。
2.正確使用生物安全柜:簡單、整潔、避免通風(fēng)口堵塞;操作前后紫外線照射,消毒劑隨手可及;廢液缸里有1/3體積的含氯消毒液,并且及時清理廢液缸,保證廢物不超過廢液缸體積的2/3。
3.核酸提取儀去污染:每天多批次檢測時,在每一批次檢測完以后必須用75%的乙醇和核酸去除劑對儀器進(jìn)行去污染。
4.重視通風(fēng):不定期對房間進(jìn)行通風(fēng),每次至少持續(xù)30min。
5.PCR擴增區(qū)去污染:PCR反應(yīng)管必須蓋緊,避免擴增后的核酸對環(huán)境的污染。
6.實驗室隨手可及的消毒劑。
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PCR實驗的污染來源都有哪些?
樣本間交叉污染:收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴(yán)導(dǎo)致外溢;不同樣本移液時忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖;移液器等實驗器具及耗材未及時消毒滅菌;不同樣本同時開蓋或樣本劇烈震蕩、反復(fù)吹吸導(dǎo)致氣溶膠形成擴散,相互交叉污染。
實驗試劑污染:主要是在 PCR 組分試劑加樣過程中,由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。加樣過程中,因為PCR試劑對溫度十分敏感,需要通過冰浴使得PCR試劑和PCR板/管處于0℃,但這個過程也充滿污染風(fēng)險。
擴增產(chǎn)物污染:大量拷貝的產(chǎn)物泄漏或擴增后的PCR反應(yīng)管意外開蓋,這是PCR反應(yīng)中主要、常見的污染問題。因為PCR產(chǎn)物拷貝量大,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測數(shù)個拷貝的極限,所以極微量的PCR產(chǎn)物污染,就可形成假陽性。