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發(fā)酵罐滅菌操作說明
罐內(nèi)的溫度逐漸上升,至所設(shè)置90°溫度時,攪拌電機停止轉(zhuǎn)動,此時打開罐體總進氣閥,打開罐體出氣管閥,依次打開以下閥門:打開出氣調(diào)節(jié)閥,緩慢打開罐 體進蒸汽閥對罐內(nèi)通入蒸汽,空氣濾器表壓開始上升,超過0.1MP時打開冷凝水閥門疏水,繼續(xù)開大罐體進蒸汽閥,除盡罐內(nèi)空氣后,罐內(nèi)壓緩慢上升,調(diào)整出 氣調(diào)節(jié)閥,使之達到滅菌所要求溫度壓力,達到滅菌溫度時計時開始。對于水溫高的地區(qū)則發(fā)酵時降溫困難,必須采用冷凍鹽水或冷凍水冷卻,增加了設(shè)備投資及生產(chǎn)成本。
調(diào)整夾套進氣閥、罐體進蒸汽閥和出氣調(diào)節(jié)閥,使溫度、罐壓保持所設(shè)溫度。滅菌時間到后,依次關(guān)閉已開的各進汽閥門,關(guān)閉蒸汽總閥門,完全放開罐內(nèi)尾氣排氣 閥放掉罐內(nèi)壓力,關(guān)閉蒸汽發(fā)生器電源。打開空氣壓縮機,等罐壓降至0.05MP時,緩慢打開進氣調(diào)節(jié)閥,維持罐內(nèi)正壓。一、溶氧對發(fā)酵影響溶解氧對發(fā)酵的影響分為兩方面:一是溶氧濃度影響與呼吸鏈有關(guān)的能量代謝,從而影響微生物生長。
滅菌過程中,操作員應(yīng)穿長衣長褲,帶防護手套,防止?fàn)C1傷。滅菌過程中如果蒸汽發(fā)生器自動進水,蒸汽總壓將迅速下降,必要時可以適當(dāng)開大蒸汽總閥門,保持壓 力,但要小心觀察壓力變化。對罐內(nèi)通蒸汽時,滅菌后罐壓下降較快,注意通無菌空氣時機。盡量不要使空氣壓縮機和蒸汽發(fā)生器同時工作。滅菌過程中空氣濾器壓 力不應(yīng)超過0.2MP。冷凝水的大小將影響罐內(nèi)液體滅菌后濃度,要考慮蒸汽冷凝水增加量。結(jié)束語發(fā)酵液中的氧含量對菌體生長和產(chǎn)物形成都有著重要的影響,溶氧量的控制主要從氧的溶解和傳遞兩個方面考慮。
種子罐廠家說明隨著分子生物工程的不斷發(fā)展,已經(jīng)為優(yōu)良的選育提供了更為廣闊的天地,用基因重組取代,改良原有的檸檬酸、青已見諸報道。
基因工程手段改造傳統(tǒng)的發(fā)酵工業(yè),已經(jīng)不是遙遙無期的事,如果我們不努力攻關(guān),分子生物工程技術(shù)優(yōu)勢很可能在新一輪的競爭中失去。隨著發(fā)酵罐的日益大型 化,它與手工麩曲制備的矛盾越來越突出,如何實現(xiàn)麩曲制備的工業(yè)化,或代之以孢子粉,是多年未能突破的難題。自然,為理想的是制成孢子粉或采用固定化技 術(shù),只是技術(shù)難度很高。目前更為現(xiàn)實的,是以固體發(fā)酵改變落后的麩曲制備工藝?,F(xiàn)在固體發(fā)酵罐早已問世,已有應(yīng)用生物制藥、酶制劑、制曲等工業(yè)的報道。如一種立式多層固體發(fā)酵罐, 投料前進行空罐滅菌。物料從頂部加料孔進入,然后進行蒸煮、滅菌,物料降溫通過內(nèi)蛇管、外夾套冷卻,罐底進入無菌空氣,從罐頂排出,達到通氣、恒溫要求, 采用軸向攪拌翻料,發(fā)酵罐容積范圍為0 .5~10m3。另一種華東理工大學(xué)的智能生物發(fā)酵罐全容量為50L~5000L, 采用外罐體轉(zhuǎn)動的攪拌方式,物料在罐體內(nèi)邊翻滾邊進行蒸汽滅菌,通過進氣調(diào)節(jié)罐內(nèi)溫度和濕度,轉(zhuǎn)速為0~30rmp ,均為不銹鋼結(jié)構(gòu)。用這類固態(tài)發(fā)酵罐來改革我們傳統(tǒng)的麩曲制備工藝,成功的希望應(yīng)該是很大的。增加進氣量,會增加空氣過濾系統(tǒng)的負(fù)擔(dān),特別是紙質(zhì)濾芯的過濾器,過濾器對空氣流量是有限制的,只有在一定范圍流量的狀態(tài)下,才能達到過濾效果。
用酒精棉火焰將接種閥灼燒,在火焰保護下接入滅好菌的三角瓶內(nèi)或試管中,塞上棉塞,放入接種室。
接種。接種室安常規(guī)方法消毒后,打開接種機,點燃酒精燈,在酒精燈火焰保護下將取樣的液體用接種鉤取菌球或菌液接入試管斜面培養(yǎng)基上,塞上棉塞。
如果沒有制作或不具備試管斜面培養(yǎng)基,可以用滅好菌的栽培袋或瓶,按前法在接種閥處直接取樣接入袋或瓶,放入培養(yǎng)室培養(yǎng)。
培養(yǎng)。放入培養(yǎng)室或恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)進行培養(yǎng),溫度為28℃--32℃。
觀察。將培養(yǎng)24h--36h之間的液體前后觀察兩次,如菌球萌發(fā)變潔白,接種面無紅、黃、綠、黑色雜菌,證明液體生長正常,液體生長成熟,然后即可使用接種;否則,說明液體已污染雜菌
總結(jié)
通過此法檢驗,可以在早期及時準(zhǔn)確地判斷出掌握液體培養(yǎng)狀態(tài),避免盲目接種到大批量栽培袋或瓶中,對指導(dǎo)液體的生產(chǎn)應(yīng)用起到了保障作用。