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武漢遠大弘元股份有限公司以氨基酸及其衍生物的研發(fā)、生產(chǎn)為基礎,以武漢大學生命科學學院和湖北省氨基酸工程技術研究中心的成果為依托,為客戶提供的產(chǎn)品。
天津工業(yè)生物技術研究所研究員劉君帶領的微生物生理和代謝工程研究組和研究員江會鋒帶領的新酶設計與酵母基因組工程研究組進行合作,通過結合代謝工程和蛋白質工程的方法,系統(tǒng)地改造大腸桿0菌,實現(xiàn)了OAH的合成。在研究中,首先比較了兩種不同來源的高絲氨酸乙酰轉移酶(MetX),然后通過敲除競爭和消耗途徑基因(meta,metB和thrB)并過表達合成途徑基因(thrA,metxlm),實現(xiàn)了OAH的積累,其產(chǎn)量達到1.68 g/L。為了進一步提高OAH的生產(chǎn),該研究采用多種代謝工程策略對工程菌株進行進一步改造,包括:敲除賴氨酸競爭途徑基因lysA;利用啟動子工程調控ppc表達以增強草酰乙0酸的供給;2012年,衛(wèi)辦監(jiān)督根據(jù)工作安排,我部正在組織修訂《食品添加劑使用標準》(GB2760-2011)。比較不同來源的天冬氨酸激酶,促進前體天冬氨酸的合成等,使OAH的產(chǎn)量提高至4.69 g/L。然而,中間代謝產(chǎn)物高絲氨酸的大量積累說明其下游途徑關鍵酶MetXlm的催化能力是不足的。為了解決這一問題,該研究分別采用基于進化保守性和基于結構信息的蛋白質工程策略對MetXlm進行改造,獲得的突變體酶活比型提高了12.15倍并受到更少的反饋抑制。通過優(yōu)化表達MetXlm突變體,使工程菌株OAH產(chǎn)量達到7.37 g/L。隨后該研究通過過表達胞內乙酰CoA合成途徑,調控胞內NADPH的合成,進一步提高OAH的合成能力。終獲得的工程菌株OAH-7在7.5 L發(fā)酵罐中經(jīng)60 h發(fā)酵能夠生產(chǎn)62.7 g/L的OAH,是目前報道的0高水平。
胱氨酸,因此只用于合成L-半胱氨酸的中間體。盡管L-胱氨酸和L-半胱氨酸的微生物方法生產(chǎn)日益受到人們的重視,但是由于技術原因,僅日本報道了有關微生物酶法生產(chǎn)L-胱氨酸和L-半胱氨酸的較為成熟的生產(chǎn)工藝
化學合成半胱氨酸需多步反應,產(chǎn)生DL-型外消旋體,只有經(jīng)過化學拆分才能得到所需要的L-半胱氨酸,用于L-半胱氨酸中間體的合成。
L-半胱氨酸的發(fā)酵法生產(chǎn)現(xiàn)在正處于嘗試探索階段,大規(guī)模的生產(chǎn)還受到一定條件的限制,其主要原因是因為微生物體內的L-半胱氨酸合成過程復雜,而且合成中的關鍵問題是一SH的來源
血同型半胱氨酸,簡稱-血同,又名Hcy。血同型半胱氨酸是一種含硫氨基酸,為蛋氨酸和半胱氨酸代謝過程中產(chǎn)生的重要中間產(chǎn)物。正常情況下,血同型半胱氨酸在體內能被分解代謝,濃度維持在較低水平。但在日常生活中由于原發(fā)性原因和繼發(fā)性原因會影響血同型半胱氨酸代謝導致血同型半胱氨酸濃度堆積升高。本品如果用于銻劑中1毒的搶救應及時足量給藥,使其最1大限度地與銻離子生成無毒性的可溶性絡合物排出體外。