再加入酶標(biāo)記的抗原或,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。
酶標(biāo)記: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 13 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 24 緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 15 標(biāo)記稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 16 顯色劑: TMB底物液 15mL x 17 終止液: 1N硫酸 12mL x 1
8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供)
使用研磨棒進行勻漿時:① 取1~100 mg的動物組織或人組織移入冰浴預(yù)冷的Collection Tube 中,用研磨棒快速研磨成糊狀。② 加入350 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1后用研磨棒快速研磨成勻漿。③ 加入350 μl的Solution A將研磨棒上的勻漿沖入Collection Tube中,充分振蕩混合后,65℃保溫5分鐘?!緩闹参锊牧匣蛑参锱囵B(yǎng)細胞中提取基因組DNA】① 按下表稱取適量的新鮮植物材料(如選用的是冷凍干燥植物材料,則用量減半),剪成小塊放入研缽中,加入液氮,待樣品冷凍完全后快速、用力研磨至粉末狀。

如從培養(yǎng)的植物細胞中提取基因組DNA,請離心收集2×103~1×107的培養(yǎng)植物細胞,加入150 μl水充分懸浮細胞后移入研缽中,加入液氮后快速、用力研磨至粉末狀。注)樣品研磨應(yīng)充分,否則將會嚴(yán)重影響基因組DNA的收率。② 將研缽移至65℃水浴,當(dāng)樣品粉末剛開始融化時,向研缽中加入700 μl的Solution A和1.2 μl的RNase A1,用力碾磨30秒。③ 收集650 μl研磨好的組織勻漿移至Collection Tube中。如勻漿體積不足650 μl,請補充Solution A至650 μl。65℃保溫15分鐘。注)處理富含纖維的根/莖等植物材料或富含淀粉、蛋白質(zhì)的種子等時,可延長水浴時間至60分鐘。