然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與次孵育結(jié)合上的HEV IgM相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng)
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或的固相化及抗原或的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或仍保持其學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或既保留其學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的或抗原)與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。蘇州夢(mèng)犀生物科技有限公司蘇州夢(mèng)犀生物科技有限公司
主要設(shè)備編輯試劑(1) 包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液):Na2CO3 1.59克NaHCO3 2.93克加蒸餾水至1000ml(2) 洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15MKH2PO4 0.2克Na2HPO4·12H2O 2.9克NaCl 8.0克KCl 0.2克Tween-20 0.05% 0.5ml加蒸餾水至1000ml(3) 稀釋液:牛白蛋白(BSA) 0.1克加洗滌緩沖液至100ml或以羊、兔等與洗滌液配成5~10%使用。