微生物菌種需要呼吸嗎?

如何對(duì)微生物菌種進(jìn)行活化

1 定期移植法的菌種復(fù)蘇較簡(jiǎn)單，直接轉(zhuǎn)接即可；

2 液體石蠟法保存的菌種在復(fù)蘇時(shí)，挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上，生長(zhǎng)繁殖后，再重新轉(zhuǎn)接一次；

3  沙土管法保存菌種在復(fù)蘇時(shí)，在無菌條件下打開沙土管，取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上，長(zhǎng)出菌落后再轉(zhuǎn)接一次?；蛉∩惩亮Ｓ谶m宜的液體培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)接斜面；

4  真空冷凍干燥法保存菌種在復(fù)蘇時(shí)先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部，將安瓿管頂部燒熱， 用無菌棉簽沾冷水，在頂部擦一圈，頂部出現(xiàn)裂紋，用挫刀或鑷子頸部輕叩一下，敲下已開裂的安瓿管的頂端，用無菌水或培養(yǎng)液溶解菌塊，使用無菌吸管移入新鮮培養(yǎng)基上，進(jìn)行適溫培養(yǎng)；

5  -80℃ 冰箱凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇時(shí)，從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管，應(yīng)立即放置38℃-40℃水浴中快速?gòu)?fù)蘇并適當(dāng)快速搖動(dòng)。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止，約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)

6  液氮超低溫凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇與-80℃ 冰箱凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇相似，從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管，應(yīng)立即放置在38℃-40℃水浴中快速?gòu)?fù)蘇并適當(dāng)搖動(dòng)。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止，一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。

                                                       低溫生物菌種為什么能適應(yīng)低溫環(huán)境？

微生物對(duì)溫度的要求不同與它們的膜結(jié)構(gòu)物理化學(xué)性質(zhì)有密切關(guān)系 根據(jù)細(xì)胞膜的液體鑲嵌模型，細(xì)胞在正常生理?xiàng)l件下，膜中的脂質(zhì)成分應(yīng)保持液晶狀態(tài)，只有當(dāng)細(xì)胞膜處于液晶狀態(tài)，才能維持細(xì)胞的正常生理功能，使細(xì)胞處于生長(zhǎng)狀態(tài)微生物的生長(zhǎng)溫度與細(xì)胞膜的液晶溫度范圍相一致。 
      1、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu) 

通過對(duì)嗜冷酶的蛋白質(zhì)模型和x一射線衍射分析表明，嗜冷酶分子間的作用力減弱，與溶劑的作用加強(qiáng)，酶結(jié)構(gòu)的柔韌性增加，使酶在低溫下容易被底物誘導(dǎo)產(chǎn)生催化作用。

2、蛋白質(zhì)合成 
嗜冷菌具有在0℃合成蛋白質(zhì)的能力。這是由于其核糖體、酶類以及細(xì)胞中的可溶性因子等對(duì)低溫的適應(yīng)，蛋白質(zhì)翻譯的錯(cuò)誤率相對(duì)低。許多中溫菌不能在O0C合成蛋白質(zhì)，一方面是由于其核糖體對(duì)低溫的不適應(yīng)，翻譯過程中不能形成有效的起始復(fù)合物，另一方面是由于低溫下細(xì)胞膜的破壞導(dǎo)致氨基酸等內(nèi)容物的泄露。
       3、合成冷蛋白 

低溫微生物適應(yīng)低溫的另一機(jī)制是合成冷休蛋白 將大腸菌從370C突然轉(zhuǎn)移到100C條件時(shí)細(xì)胞中會(huì)誘導(dǎo)合成一組冷休蛋白，它們對(duì)低溫的生理適應(yīng)過程中發(fā)揮著重要作用，檢測(cè)嗜冷酵母的冷休反應(yīng)，發(fā)現(xiàn)冷刺激后冷休蛋白在很短時(shí)間內(nèi)大量產(chǎn)生。 耐冷菌由于生活在溫度波動(dòng)的環(huán)境中，它們必須忍受溫度的快速降低，這與它們產(chǎn)生的冷休蛋白是密切相關(guān)的。

低溫生物菌種的寄主分離法

即從生長(zhǎng)有某種真菌的寄主體上(如茯苓、木耳木段)取下木片，進(jìn)行分離的方法。如木耳制種時(shí)，可選朵大、出耳多、質(zhì)厚的耳棒(即長(zhǎng)有木耳的木段)。采集后，削去耳根下的樹皮，將其橫斷面鋸成1 厘米厚的木片，在無菌條件下，切去無耳菌絲部分，留下有耳菌絲部分，浸入0 . 1 %水中1 分鐘，取出再用無菌水沖去木片上的液。然后，用解剖刀將木片切成0 . 5 厘米的小塊，放入斜面培養(yǎng)基內(nèi)，置24 ~26 ℃下培養(yǎng)，及時(shí)淘汰雜菌，選取純菌絲進(jìn)行移植培養(yǎng)，即得菌種。