高架十字迷宮試驗 ：

EPM ) 既可以建立焦躁應激的模型也是國際上公認的經典測量焦躁反應的方法。其原理是利用動物對新異環(huán)境的探究特性和對高懸敞開臂的恐 懼心理, 形成動物的矛盾沖突來考察大鼠的焦躁狀態(tài)。 EPM 測試的項目中, 焦躁動物的 OE% 和 OT% 會明顯降低, 經典抗焦躁藥則使兩者升高, OE CE 反映了動物的運動活性。本研究發(fā)現模型組大鼠的 OE% 和 OT% 顯著下降, 運動活性也降低。HD反映了動物在非保護區(qū)內的探索行為, 代表動物對陌生環(huán)境的好奇探究或因恐懼而尋求逃避, 與焦躁程度有一定相關性, 本研究中空瓶應激后的大鼠 HD行為減少; RR可用來觀察藥有無鎮(zhèn)靜作用及鎮(zhèn)靜強度。上述結果證實, 慢性應激后的大鼠明顯處于焦躁狀態(tài), 說明慢性焦躁應激大鼠模型的制備成功, 且通過量化的標準客觀反映出大鼠的焦l慮程度。

灌注固定主要用于神經系統，其他組織意義不是很大，而且耗時耗力。對神經系統防止變性效果較好！

小鼠灌注

灌流固定小鼠時一般采用輸液器的針頭 (4 號半，這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白，針頭要從心軸方向進針，然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了，開始灌流后剪破右心耳，約 40 毫升生理鹽水，后再灌流約 20 毫升多聚甲醛，整個灌流固定的過程就完成了。

注意事項

1. 針頭大小與動物的種類有關，t 同時針頭一定要磨鈍。

2. 檢查灌注泵的運作情況，一定排出管子的氣泡和空氣，防止空氣栓塞。

3. 經腹腔暴腔，先清楚升主動脈外面的脂肪組織和心外膜組織。

4. 將針頭經左心室插入升主動脈（顏色變白的哦），并用鉗子固定。

5. 解開右心耳，同時開啟灌注泵。注意，不要隨便揭開心臟的其他部位，否則有時候可能會灌注成功但是絕大部分會造成灌注不成功，尤其。

6. 將 4 度的生理鹽水（好已動物的發(fā)白為標準，我們實驗室的大鼠約用 250ml）和多聚甲醛 (根據所取得材料而定) 依次灌入。

7. 整個過程均應將動物放在冰上，以便于更好地保存目的蛋白和酶的活性。