在醫(yī)學教學、科研和醫(yī)學工作中，不論是從事基礎醫(yī)學的還是臨床醫(yī)學、預防醫(yī)學，都需要用實驗動物來進行各種實驗。通過對動物的實驗的觀察和分析，來研究和解決醫(yī)學上存在的許多問題，動物 實驗方法 已成為醫(yī)學科學研究和教學工作中的重要手段。動物實驗方法是多種多樣的，在醫(yī)學的各個領域內(nèi)都有其不同的應用，其中一些基本方法都是共同性的，如動物的選擇、抓取、固定、、脫毛、給藥、采血、采尿、急救、處死、尸檢等，不管是從事何種課題的醫(yī)學研究都要用這套基本方法，因此，動物實驗基本方法，已成為醫(yī)學科技工作者必須掌握的一項基本功。d-17d可以成功制作改良尼古J依賴戒斷大鼠模型,尼古J戒斷后大鼠疼痛敏感性加高。

營養(yǎng)不良性gan硬化動物模型

(1)fu制方法  離乳雄性大鼠，每日喂食缺乏dan堿的低蛋白高脂肪飼料8～10g，連續(xù)2～3個月。該飼料用酪蛋白或大豆作為蛋白來源，另加蔗糖、豬油、維生素粉、鹽和定量的L-胱酸而組成。造模過程中，每日觀察動物的一般活動狀況，每周稱量動物體重，造模結(jié)束后抽取全血制備xue清、稱取部分肝組織制備勻漿作生化檢測，摘取一些qi官稱重，換算成臟器系數(shù)，并對肝組織進行組織形態(tài)學檢查。動物模型的設計原則重復性理想的動物模型應該是可重復的，甚至是可以標準化的。

(2)模型特點  造模1個月時，約有20％動物si亡，2個月時，動物體重增長停止，有fu水潴留、出血、脫毛等現(xiàn)象出現(xiàn)，巨檢可見典型的肝結(jié)節(jié)、脾腫大、腹shui潴留、yi腺腫大、gao丸萎縮等特有癥狀，有的還出現(xiàn)shen硬化，光鏡檢查顯示，造模初期，肝組織呈小結(jié)節(jié)性脂肪gan硬化，隨著飼育時闖的延長，出現(xiàn)粗大的結(jié)節(jié)性或小葉性gan硬化。實驗動物本身在實驗處理前、后兩個階段的各項相關(guān)數(shù)據(jù)就分別是對照組和實驗組的實驗結(jié)果，此法可排除生物間的個體差異。

(3)比較醫(yī)學  膳食不平衡或特種營養(yǎng)素缺乏可以導致動物肝細胞病變。應特別注意對動物源性氣溶膠的防護，例如對動物的剖檢應在負壓剖檢臺上進行。實驗證明，長期喂食dan堿缺乏食物可誘發(fā)大鼠肝脂變、肝纖維化乃至gan硬化。本模型采用離乳大鼠是由于幼鼠在發(fā)育期階段對dan堿的需求量較大，因dan堿缺乏造成對機體傷害的敏感性自然比成年動物更強。但事實上，對dan堿缺乏的敏感性取決于體內(nèi)dan堿氧化酶的含量。人類gan臟不含dan堿氧化酶，不存在dan堿缺乏問題，所以此模型不適于在發(fā)病機制上進行人類相關(guān)疾病的研究。不過，該模型由于fu制周期長，飼料配制復雜，花費大，現(xiàn)已少見有單用此方法造模者。此外，實驗中使用雄性動物雄鼠是因為雄性動物在向gan硬化轉(zhuǎn)化過程中比雌性動物更為均一。在飼料中混入微量的半胱氨酸具有促進gan硬化發(fā)展的作用。

睡眠剝奪模型

實驗用金屬箱直徑35 cm， 每箱裝1只大鼠。但本模型(犬)在測定肺功能時表明，動物呼氣流速的下降與靜態(tài)順應性的下降不成比例，同時病理組織學也證實動物氣道萎縮，氣道病變說明本模型不是單純性的較佳模型。REMSD 各組分別置于直徑為6.5 cm的小站臺上，對照組大鼠置于直徑15 cm的大站臺上，周圍是水環(huán)境,水深3 cm，平臺在水面以上1 cm，于平臺以上14 cm 處放籠罩，上面放水和食物。水溫和室溫保持在25 C，每日換水并打掃實驗箱。REMSD 組大鼠在小臺上屈曲而立，在快動眼睡眠(rapid eye movement sleep， REMS) 時，由于伴隨全身肌肉松弛和節(jié)律性垂頭，大鼠落入水中而驚醒，再爬上站臺。用此方法自18:00開始連續(xù)剝奪大鼠的REMS至相應實驗時間點。

 曠場實驗( open field test， OFT )

實驗裝置為高60 cm、 底面邊長100 cm、內(nèi)壁涂黑的無蓋方箱，底面平均分為25個小方格，正上方2 m處架一攝像機，鏡頭對準箱底，實驗在安靜環(huán)境下進行，大鼠置于方箱底面中心，同時進行攝像和計時，3 min 后停止攝像,更換動物后，繼續(xù)進行實驗。此時，動物將作為人體的代替者或模型來使用，而對構(gòu)造上、機能上所表現(xiàn)的種間異同問題，應從比較生物學方面去了解。2次實驗之間清洗箱壁及底面，以免上次動物余留的信息影響下次實驗結(jié)果。計分方法:通過放像設備，觀察大鼠3 min內(nèi)越過的格子數(shù)為水平得分，后肢站立次數(shù)為垂直得分，兩者之和為OFT總得分。REMSD實驗前后均進行曠場實驗。

Y迷宮實驗幾種常見的行為學測試方法

1、Y迷宮（Y-Maze）交替行為測試原理

Y-迷宮由Dellu F等發(fā)明，被廣泛應用于功能減退、趨向性、空間工作記憶等研究領域。此方法屬于腹膜炎攻擊方法的一種，主要是通過手術(shù)方式將小鼠自身盲腸內(nèi)容物釋放到腹腔造成gan染，從而模擬膿毒癥的發(fā)生和發(fā)展。Y迷宮主要用于研究嚙齒類動空間工作記憶，其完全是利用實驗動物對新異環(huán)境探索的天性，由于動物每次轉(zhuǎn)換探索方向時都需要記住前一次探索過的方向，因此Y型迷宮實驗能夠有效地測定動物的空間工作能力。

1.1  Y迷宮交替行為測試及參數(shù)

  自制Y迷宮，由3等長臂組成（50cm×18cm×35cm），每兩個臂之間夾角為

120度，在中央處各有一個可移動的隔板，迷宮內(nèi)臂及底部均涂為黑色。髓磷脂特異性T細胞在外周被ji活，穿過血腦屏障進入zhong樞神經(jīng)系統(tǒng)并被重新ji活，引發(fā)一系列yan癥反應，導致脫髓鞘和軸突細胞凋亡，zui終導致神經(jīng)損傷和失去功能。參照文獻實驗操作方法并加以改進，將大鼠放在Y迷宮任意一臂末端，任其自由探索8min，攝像系統(tǒng)記錄動物8min的行為變化，記錄以下各項指標：①總進臂次數(shù)（the total number of entries）：動物進入迷宮臂的次數(shù)（以大鼠四只腳均進入臂為進臂一次標準）；②輪流（交替）一次（an alternation）：依次連續(xù)進入Y迷宮全部三個臂一次。③*大輪流次數(shù)（The number of maximum alternati）：總進臂次數(shù)-2。自發(fā)輪流行為得分=總輪流次數(shù)/*大輪流次數(shù)*100%。