【廣告】
動(dòng)物模型設(shè)計(jì)的注意事項(xiàng)
注意模型要盡可能再現(xiàn)所要求的人類疾病
模型時(shí)必須強(qiáng)調(diào)從研究目的出發(fā),熟悉誘發(fā)條件、宿主特征、疾病表現(xiàn)和發(fā)病機(jī)理,即充分了解所需動(dòng)物模型的全部信息,分析是否能得到預(yù)期的結(jié)果。例如誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化時(shí),草食類動(dòng)物兔需要的膽固醇劑量比人高得多,而且病變部位并不出現(xiàn)在主動(dòng)脈弓。病理表現(xiàn)為纖維組織和平滑肌為主,可有大量泡沫樣細(xì)胞形成斑塊,這與人類的情況差距較大。因此要求研究者懂得,各種動(dòng)物所需的誘發(fā)劑量、宿主年齡、性別和遺傳性狀等對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響,以及動(dòng)物疾病在組織學(xué)、生化學(xué)、病理學(xué)等方面與人類疾病之間的差異。要避免選用與人類對(duì)應(yīng)相似性很小的動(dòng)物疾病作為模型材料。為了增加所動(dòng)物疾病模型與人類疾病的相似性,應(yīng)盡量選用各種敏感動(dòng)物與人類疾病相應(yīng)的動(dòng)物模型,可參考相關(guān)文章《各種敏感動(dòng)物與人類相似的疾病模型》。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的除毛
一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的除毛
在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,被毛有時(shí)會(huì)影響實(shí)驗(yàn)操作與觀察,因此必須除去。除去被毛的方法有剪毛、拔毛、剃毛和脫毛等。
(一)剪毛法:剪毛法是將動(dòng)物固定后,先用蘸有水的紗布把被毛浸濕,再用剪毛剪刀緊貼皮膚剪去被毛。不可用手提起被毛,以免剪破皮膚。剪下的毛應(yīng)集中放在一容器內(nèi),防止到處飛揚(yáng)。給狗、羊等動(dòng)物采血或新牛放血制備常用此法。
(二)拔毛法:拔毛法是用拇指和食指拔去被毛的方法。在兔耳緣靜脈注射或尾靜脈注射時(shí)常用此法。
(三)剃毛法:剃毛法是用剃毛刀剃去動(dòng)物被毛的方法。如動(dòng)物被毛較長,先要用剪刀將其剪短,再用刷子蘸溫肥皂水將剃毛部位浸透,然后再用剃毛刀除毛。本法適用于暴露手術(shù)區(qū)。
(四)脫毛法:脫毛法是用化學(xué)藥品脫去動(dòng)物被毛的方法。首先將被毛剪短,然后用棉球蘸取脫毛劑,在所需部位涂一薄層,2~3分鐘后用溫水洗去脫落的被毛,用紗布擦干,再涂一層油脂即可。
適用于狗等大動(dòng)物的脫毛劑配方為:10g,生石灰15g,溶于100ml水中。
適用于兔、鼠等動(dòng)物的脫毛劑的配方為:1. 3g,肥皂粉1g,淀粉7g,加適量水調(diào)成糊狀;2. 8g,淀粉7g,糖4g,甘油5g,硼砂1g,加水75ml;3. 8g溶于100ml水中。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物如何選擇?這個(gè)問題對(duì)于藥理和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物專業(yè)的朋友來說,不是難事。但對(duì)于需要做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的其它專業(yè)的朋友來說,有時(shí)候會(huì)感到茫然。或者沒有自己的思考,照抄別人的做法。
對(duì)于這一部分站友,我們不可能要求去系統(tǒng)學(xué)習(xí)《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)》,但我們可以常備一本在身邊。在需要用的時(shí)候翻一翻,將會(huì)使你豁然開朗。因?yàn)闀斜容^詳細(xì)地介紹了常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的解剖生理、生物學(xué)習(xí)性等等,主要的是它為你選擇什么樣的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提供了重要的參考。
因此,系統(tǒng)學(xué)習(xí)或者零星地翻閱《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)》是保證合理選用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基礎(chǔ)之一。再者就是要參考大量文獻(xiàn)。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇在此,提幾點(diǎn)原則和方法。
第①,做什么樣的實(shí)驗(yàn)?什么動(dòng)物適合本實(shí)驗(yàn)?做什么實(shí)驗(yàn),這是選題時(shí)就確定好了的??隙ㄊ墙?jīng)過論證的。無需多講。用什么樣的動(dòng)物呢?我想,大多是參照文獻(xiàn),再結(jié)合自己對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的了解。選題之時(shí)就肯定閱讀過很多文獻(xiàn)了,因此不會(huì)陌生。
如:做高、動(dòng)脈粥樣硬化,我想大多數(shù)人會(huì)選擇大鼠、兔子,也可以選金黃地鼠、鵪鶉,少數(shù)人會(huì)選小鼠,但我想用狗和猴的基本上不會(huì)有吧。因?yàn)橐x擇比較容易形成此疾病的動(dòng)物,且要易得。
所以,對(duì)于不太熟悉的人來說,要多看文獻(xiàn),參考別人是如何選擇的。就算是對(duì)動(dòng)物比較了解,系統(tǒng)學(xué)過這方面知識(shí)的,也要多看文獻(xiàn),綜合權(quán)衡。切忌隨意地憑空想像。
第二,采取什么樣的方法造模?做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)通常是要造模的。選擇什么樣的方式?這要從實(shí)驗(yàn)的目的及條件入手。造,可以用手術(shù),也可以用。其中有四氧及鏈脲佐菌素(STZ)。后者用得較多,且為國際認(rèn)同。
而四氧目前用得較少了。造模方法一是參照《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》,二是參照文獻(xiàn)。造模方法有時(shí)也決定了你的動(dòng)物選擇。像做手術(shù)造動(dòng)脈粥樣硬化,我想用大鼠比小鼠來得方便吧?
第三,經(jīng)費(fèi)承受能力如何?做實(shí)驗(yàn)也要精打細(xì)算。不可能為了所謂的高水平、技術(shù)而不顧實(shí)驗(yàn)室的條件。像做高脂動(dòng)物模型,假設(shè)經(jīng)費(fèi)只有一萬多元,一定要弄個(gè)敲除APoE基因的小鼠來做,恐怕沒人認(rèn)同。做一個(gè)簡單的鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn),你非得要用SPF實(shí)驗(yàn)室,這也是不太實(shí)際的,也是沒必要的。