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實驗動物的選擇
小鼠
小鼠性情較溫順,一般不會咬人,比較容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴將其放在鼠籠蓋或其它粗糙表面上,在小鼠向前掙扎爬行時,用左手拇指和食指捏住其雙耳及頸部皮膚,將小鼠置于左手掌心、無名指和小指夾其背部皮膚和尾部,即可將小鼠固定。在一些特殊的實驗中,如進行尾靜脈注射時,可使用特殊的固定裝置進行固定,如尾靜脈注射架或粗的玻璃試管。如要進行手術(shù)或心臟采血應(yīng)先ma醉再操作,如進行解剖實驗則必須先無痛處死后再進行。
實驗動物的給法
(一)注射給藥法
1. 皮射 注射時用左手拇指及食指輕輕捏起皮膚,右手持將針頭刺入,固定后即可進行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或側(cè)下腹部;豚鼠在后大腿內(nèi)側(cè)、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部注射;蛙可在脊背部淋巴囊注射;狗多在大腿外側(cè)注射,拔針時,輕按片刻,防藥液逸出。
2. 皮內(nèi)注射 此法用于觀察皮膚血管的通透性變化或觀察皮內(nèi)反應(yīng)。 如將一定量的性同位素溶液、顏料或致炎物質(zhì)、等注入皮內(nèi),觀察其消失速度和局部血液循環(huán)變化,作為皮膚血管通透性觀察指標(biāo)之一。方法是:將動物注射部位的毛剪去,消毒后,用皮試針頭緊貼皮膚皮層刺入皮內(nèi),然后使針頭向上挑起并再稍刺入,即可注射藥液。注射后可見皮膚表面鼓起一白色小皮丘。
3. 肌肉注射 當(dāng)給動物注射不溶于水而混懸于油或其他溶劑中的時,常采用肌肉注射。肌肉注射一般選用肌肉發(fā)達、無大血管經(jīng)過的部位,多選臀部。
注射時針頭要垂直快速刺入肌肉,如無回血現(xiàn)象即可注射。給大、小鼠作肌肉注射時,選大腿外側(cè)肌肉進行注射。
4. 腹腔注射 先將動物固定,腹部用酒精棉球擦試消毒,然后在左或右側(cè)腹部將針頭刺入皮下,沿皮下向前推進約0.5厘米,再使針頭與皮膚呈45 度角方向穿過腹肌刺入腹腔,此時有落空感,回抽無腸液、尿液后,緩緩?fù)迫胨幰?。此法大小鼠用的較多。
5. 靜脈注射 是將藥液直接注射于靜脈管內(nèi),使其隨著血液分布全身,迅速奏效。但排泄較快,作用時間較短。
小鼠、大鼠的靜脈注射:常采用尾靜脈注射。鼠尾靜脈共有3根, 左右兩側(cè)和背側(cè)各1根,兩側(cè)尾靜脈比較容易固定,故常被采用。操作時,先將動物固定在暴露尾部的固定器內(nèi)(可用燒杯、鐵絲罩或粗試管等物代替),用75%酒精棉球反復(fù)擦試使血管擴張, 并可使表皮角質(zhì)軟化,以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側(cè),使靜脈充盈,注射時針頭盡量采取與尾部平行的角度進針。
大鼠甲狀腺功能亢進癥
方法將50只大鼠隨機分為正常組、jia亢模型組、jia亢方中劑量組、jia亢方高劑量組、西藥對照組(每組10只),除正常組外,其余4組大鼠每日按75 μg/100 g體重灌服優(yōu)甲樂(左甲狀腺素鈉)造成大鼠jia亢模型,不同劑量jia亢方內(nèi)服,并與西藥對照,21 d后放免法測定xue清游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)、三碘甲狀腺原氨酸(T3)、促甲狀腺ji素(TSH)、含量甲狀腺素(T4)。結(jié)果jia亢方能降低jia亢大鼠xie清T3、T4、FT3、FT4含量,提高xue清TSH,以高劑量效果顯著;能改善jia亢模型大鼠甲狀腺組織病理變化,其中高劑量組甲狀腺組織結(jié)構(gòu)基本同正常組。結(jié)論jia亢方能夠顯著改善jia亢大鼠甲狀腺功能和甲狀腺組織病理變化。
膿毒癥模型
膿毒癥模型方法及原理
一般構(gòu)建膿毒癥模型有多種方式,例如細菌攻擊、內(nèi)毒su攻擊、腹膜炎攻擊等,針對小鼠較為經(jīng)典的方法為盲腸jie扎穿刺(CLP)。此方法屬于腹膜炎攻擊方法的一種,主要是通過手術(shù)方式將小鼠自身盲腸內(nèi)容物釋放到腹腔造成gan染,從而模擬膿毒癥的發(fā)生和發(fā)展。
實驗方法
Step1:常規(guī)方法ma醉小鼠,剔除腹部毛發(fā),酒精消毒
Step2:腹部正中開口,逐層打開皮膚和腹膜,暴露盲腸
Step3:使用銳器刺穿盲腸尾部1/2位置,擠出內(nèi)容物
Step4:放置引流物,時盲腸內(nèi)容物可持續(xù)流出
Step5:逐層縫合皮膚,碘伏消毒,將小鼠放回籠內(nèi)飼養(yǎng)