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熒光分光光度計的功能特點(diǎn)
1. 熒光發(fā)射光譜選擇某一固定波長的光激發(fā)樣品,記錄樣品中產(chǎn)生的熒光發(fā)射強(qiáng)度與發(fā)射波長間的函數(shù)關(guān)系,即得熒光發(fā)射光譜。
2. 熒光激發(fā)光譜選定某一熒光發(fā)射波長記錄熒光發(fā)射強(qiáng)度作為激發(fā)光波長的函數(shù),即得熒光激發(fā)光譜。
3.時間分辨技術(shù);可用于對混合物中光譜重疊但有壽命差異的組分進(jìn)行分辨并分別測量。時間分辨熒光測定公式如下:P(t) = P0 EXP (-t /τ)式中P(t):擬合指數(shù)函數(shù)P0:強(qiáng)度取值EXP:指數(shù)運(yùn)算符t:時間取值τ:熒光平均時間壽命
淺析熒光光譜
無論分子初處于哪一個激發(fā)單重態(tài),通過內(nèi)轉(zhuǎn)換及振動弛豫,均可返回到激發(fā)單重態(tài)的低振動能級,然后再以輻射形式發(fā)射光而返回至基態(tài)的任一振動能級上,這時發(fā)射的光稱為熒光。由于振動弛豫和內(nèi)轉(zhuǎn)換損失了部分能童,故熒光的波長總比激發(fā)光波長要長。發(fā)射熒光的過程為 秒。由于電子返回基態(tài)時可以停留在基態(tài)的任一振動能級上,因此得到的熒光譜線有時呈現(xiàn)幾個非??拷姆濉Mㄟ^進(jìn)一步振動弛豫,這些電子都很快地回到基態(tài)的低振動能級。
熒光光譜
熒光分析的第二個特點(diǎn)是選擇性強(qiáng),特別是對有機(jī)化合物而言。因熒光光譜既包括激發(fā)光譜又包括發(fā)射光譜,凡是能發(fā)射熒光的物質(zhì),必須首先吸收一定波長的紫外線,而吸收了紫外線后不一定就發(fā)射熒光。能發(fā)射熒光的物質(zhì),其熒光波長也不盡相同。如果即使熒光光譜相同的話,而它的激光光譜也不一定相同。反之如果它們的激發(fā)光譜相同,則可用發(fā)射光譜把它們區(qū)分開來,因此供選擇的余地是比較多的。所以熒光分析的選擇性很強(qiáng)。例如有兩種物質(zhì),它們的熒光光譜很相似,不易把它們分開。但它們的激光光譜不會相同,因此就可用掃描激光光譜把它們分開。如果用分光光譜法就難以辦到這一點(diǎn),因為分光光譜只能得到待測物質(zhì)的特征吸收光譜。所以分光光譜法的選擇性就沒有熒光分析法強(qiáng)。