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組合形式PCR實驗室設計中的一些經(jīng)驗:
試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入,造成污染;
可以通過控制進風風量大于排風風量達到正壓效果;
核酸擴增室及產(chǎn)物分析室應呈微負壓,以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品,可以通過控制排風風量大于進風風量達到負壓效果;
在理想情況下,PCR實驗室緩沖間應該設置正壓模式,使室內(nèi)空氣不流向室外,室外空氣不流向室內(nèi)。 PCR實驗室進風由原有空調(diào)控制,要求將空調(diào)風口安裝到定點,且高度為地面鋪裝好后2600毫米處。
PCR實驗室設計時,應該讓墻壁和天花板具有牢固的結(jié)構(gòu)和良好的氣密性;所有內(nèi)角應采用圓弧線過渡;墻體內(nèi)壁光滑,不吸附,耐腐蝕,易于清洗消毒;地面材料應滿足無縫隙、無滲漏、光滑、耐腐蝕的要求。
實驗室建設公司
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一般三級醫(yī)院都擁有標準PCR實驗室與具備核酸檢測的能力。而此次對二級醫(yī)院也提出同樣要求,意味著二級醫(yī)院也需要配備PCR實驗室。標準的PCR實驗室一般分為四個區(qū),一區(qū)為試劑準備區(qū),二區(qū)為標本制備區(qū),三區(qū)為PCR擴增區(qū),四區(qū)為產(chǎn)物分析區(qū)。
為避免交叉污染,進入各個工作區(qū)域必須嚴格遵循單一方向進行,即只能從試劑貯存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增反應混合物配制和擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)。各實驗區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應通過傳遞窗進行。如今市面上絕大部分新冠病毒檢測試劑盒是在熒光定量PCR平臺上開發(fā)的,因此沒有產(chǎn)物分析區(qū)也不會影響新冠病毒的檢測,60-80平米的場地就能滿足要求,但是其他如基于一代測序與基因芯片的檢測項目就無法開展。
PCR實驗室合并問題
PCR不同區(qū)域可合并情況(一)
場景:使用實時熒光PCR儀依據(jù):相關機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則;衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號合并:擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)可合并
PCR不同區(qū)域可合并情況(二)
場景:采用樣本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀依據(jù):相關機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則;衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號合并:標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)可合并。
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PCR實驗室的空氣流向管理與環(huán)境消毒?
PCR實驗室可分為試劑準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)和產(chǎn)物檢測區(qū)四個區(qū)域,這四個區(qū)域在物理空間上必須完全相互獨立,各區(qū)域無論是在空間上還是在使用中,應當始終處于完全的分隔狀態(tài),不能有空氣的直接相通。
所以,臨床基因擴增檢驗實驗室的空氣流向應按:試劑準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→產(chǎn)物檢測區(qū),應時刻防止擴增產(chǎn)物順空氣氣流進入擴增前區(qū)域??砂凑丈鲜鲰樞騾^(qū)域空氣壓力遞減的方式進行,也可通過安裝排風扇、負壓排風裝置或其他可行方式實現(xiàn)。