細(xì)胞檢測(cè)服務(wù)

作為生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位，細(xì)胞在機(jī)體的各項(xiàng)新陳代謝的生命活動(dòng)中發(fā)揮著重要的作用，與此同時(shí)，細(xì)胞的生理過(guò)程，在一定程度上也是機(jī)體生命活動(dòng)的反應(yīng)。因此利用多種精密儀器，結(jié)合特異性的檢測(cè)試劑，對(duì)體外培養(yǎng)的細(xì)胞直接檢測(cè)其增殖的基本過(guò)程，或?qū)?xì)胞進(jìn)行不同的處理后檢測(cè)細(xì)胞生活周期內(nèi)各項(xiàng)指標(biāo)的變化，從而深入揭示細(xì)胞新陳代謝的具體機(jī)制。自噬形成時(shí)，GFP-LC3融合蛋白轉(zhuǎn)位至自噬體膜，在熒光顯微鏡下形成多個(gè)明亮的綠色熒光斑點(diǎn)，一個(gè)斑點(diǎn)相當(dāng)于一個(gè)自噬體，可以通過(guò)計(jì)數(shù)來(lái)評(píng)價(jià)自噬活性的高低。

細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的污染及解決方法

原生動(dòng)物污染

原生動(dòng)物污染后，細(xì)胞培養(yǎng)基變得輕微渾濁。在顯微鏡下，大量的小點(diǎn)來(lái)回移動(dòng)。雖然此時(shí)細(xì)胞仍能生長(zhǎng)，但繁殖速度減慢，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不好，邊緣不清，變得不透明。原生動(dòng)物與細(xì)胞形成共生關(guān)系。同時(shí)，原生動(dòng)物與細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)。破骨細(xì)胞標(biāo)志基因TRAP在共培養(yǎng)3天時(shí)開(kāi)始表達(dá)，而MMP-9和CathepsinK則在共培養(yǎng)5天后表達(dá)結(jié)論共培養(yǎng)體系中成骨細(xì)胞對(duì)破骨細(xì)胞調(diào)控作用顯著誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞具有噬骨能力，該共培養(yǎng)模型可用于成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞之間的相互調(diào)控作用研究。這種共生現(xiàn)象非常普遍，但以細(xì)胞為主，因?yàn)樵鷦?dòng)物的數(shù)量相對(duì)較少，因而對(duì)細(xì)胞的正常生長(zhǎng)沒(méi)有影響，只有當(dāng)它們達(dá)到一定數(shù)量時(shí)，才終爆發(fā)成為循環(huán)。

解決方法：原生動(dòng)物污染的原因有很多，如液體消毒問(wèn)題、操作問(wèn)題、環(huán)境問(wèn)題等，如果細(xì)胞足夠，果斷丟棄被污染的細(xì)胞和復(fù)蘇細(xì)胞。如果要保留，需要購(gòu)買(mǎi)使用相關(guān)的滅菌試劑。

選擇實(shí)驗(yàn)外包公司需要注意哪些事項(xiàng)？

技術(shù)支持

盡量有專門(mén)的技術(shù)負(fù)責(zé)對(duì)接項(xiàng)目，或者有技術(shù)服務(wù)群。隨時(shí)溝通項(xiàng)目問(wèn)題，定期匯報(bào)實(shí)驗(yàn)進(jìn)展。這樣能把控實(shí)驗(yàn)進(jìn)度，結(jié)果數(shù)據(jù)有疑問(wèn)也可以交流，不要實(shí)驗(yàn)做完就沒(méi)人管了。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

明確提供實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)、原始圖片，并有保密協(xié)議不外傳數(shù)據(jù)和客戶的信息。確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的完整性、唯獨(dú)性、真實(shí)性。這也是找實(shí)驗(yàn)外包很關(guān)心的原則。另外結(jié)果盡量有實(shí)驗(yàn)報(bào)告形式，包含所用材料、實(shí)驗(yàn)步驟和結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析，方便寫(xiě)文章時(shí)直接使用。另外實(shí)驗(yàn)都是有不確定性的，如果外包公司能保證一定能做出預(yù)期的結(jié)果，那多半是不靠譜的。2%的瓊脂糖和2xDMEM培養(yǎng)基(含有2x和20%的小牛血l清)混合后，取3mL混合液注入直徑6cm平皿中(10cm平皿加7~10mL)，冷卻凝固，可作底層瓊脂置CO2溫箱中備用。做實(shí)驗(yàn)不怕出問(wèn)題，的外包公司會(huì)負(fù)責(zé)到底，有問(wèn)題反饋再處理就好。