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D 細(xì)胞培養(yǎng)-支架三維培養(yǎng)
當(dāng)前市場上有多種類型的 3D 培養(yǎng)系統(tǒng),根據(jù)產(chǎn)品是否為細(xì)胞提供支撐(支架)材料(scaffold)大體可分為兩種類型:基于支架(scaffold)的培養(yǎng)體系和無 scaffold 的培養(yǎng)體系。數(shù)顯式循環(huán)泵易于操作,利用此設(shè)備還能研究流速或者剪切力對細(xì)胞生長的影響。今天來介紹一下有支架的三維培養(yǎng)體系。 注:無支架三維(3D)細(xì)胞產(chǎn)品綜合
一、根據(jù)支持物的性質(zhì)分類,基于 scaffold 的培養(yǎng)體系可分為天然細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular matrix,ECM)作為支持材料的 3D 培養(yǎng)和人造基質(zhì)作為支持材料的 3D 培養(yǎng)。
life 水凝膠中細(xì)胞的固定與標(biāo)記
使用小分子物質(zhì),例如熒光標(biāo)記 phalloidin,核酸染料,活性和毒性檢測試劑,增值檢測試劑等小分子物質(zhì)進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記方法,除了在孵育時間上適度延長以便能在水凝膠中充分?jǐn)U散外,與傳統(tǒng)的 2D 細(xì)胞培養(yǎng)方式相同。觸摸彩屏智能控溫儀除以上功能外,可程式編程,可顯示運(yùn)行曲線,可直接查看同一時間的溫度、濕度、CO2濃度三組曲線的變化情況及異常報警開關(guān)功能,控溫更精l確,配有進(jìn)口紅外濃度探頭,CO2濃度更穩(wěn)定,安全保護(hù)功能更完善。所培養(yǎng)的細(xì)胞如果經(jīng)基因修飾還有熒光蛋白,則可直接用于觀測,因凝膠完全透明不影響觀測結(jié)果。如果使用抗l體等大分子對細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記則不能直接在水凝膠中開展,因水凝膠的孔徑原因,不適合直接抗l體標(biāo)記,需要使用 dextranase 將細(xì)胞從水凝膠中釋放出來,如果擔(dān)心細(xì)胞在操作過程中細(xì)胞生理活動波動,則可經(jīng)在凝膠中將細(xì)胞固定后在進(jìn)行操作。
對于 PS 三維培養(yǎng)支架和 PCL 三維培養(yǎng)支架的主要區(qū)別: PS三維培養(yǎng)支架PCL三維培養(yǎng)支架材質(zhì)聚苯l乙烯(PS)聚己內(nèi)酯(PCL)透明度透明,三維培養(yǎng)時可用顯微鏡實(shí)時觀測不透明,需要做成切片后用顯微鏡觀測是否可切割不可切割可切割,可做切片是否可降解不可降解,不能用于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)可降解,可用于動物體內(nèi)實(shí)驗(yàn),降解時間約2年
選用 3D Biotek 產(chǎn)品能獲得高的細(xì)胞培養(yǎng)效率;增加細(xì)胞l因子、抗l體和其它生物分子的產(chǎn)出量,且生成的細(xì)胞l因子、抗l體等易于分離;減少動物實(shí)驗(yàn),體外研究即可獲高預(yù)測性資料,在開發(fā)新藥中降低成本和時間,縮短進(jìn)入市場的時間等優(yōu)點(diǎn)。