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偏光鏡檢術(shù)的方式及要求
(1)正相鏡檢(Orthscope):又稱無畸變鏡檢,其特點是使用低倍物鏡,不用伯特蘭透鏡(Bertrand Lens),被研究對象可直接用偏振光研究。同時為使照明孔徑變小,推開聚光鏡的上透鏡。正相鏡檢用于檢查物體的雙折射性。
(2)錐光鏡檢(Conoscope):又稱干涉鏡檢,研究在偏振光干涉時產(chǎn)生的干涉圖樣,這種方法用于觀察物體的單軸或雙軸性。在該方法中,用強會聚偏振光束照明。
(1)載物臺的中心與光軸同軸。
(2)起偏鏡和檢偏鏡應(yīng)處于正交位置。
(3)制片不宜過薄。
低倍鏡、高倍鏡的使用方法
偏光顯微鏡的使用方法
一)低倍鏡、高倍鏡的使用練習(xí)
1. 觀察文字或字母裝片:取一片字母裝片,用低倍鏡觀察,反復(fù)練習(xí)對光、調(diào)光、標(biāo)本放置和調(diào)節(jié)焦距等。如將玻片前后左右移動時,注意物像與玻片移動方向是否一致,玻片上的字母是正像還是反像,為什么?
2. 觀察羊(或頭發(fā))交叉裝片:取一張毛(發(fā))交叉裝片,先用低倍鏡觀察,找到兩根毛(發(fā))后,再將毛(發(fā))交叉點移到視野中央,然后換高倍鏡觀察,再輕微轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)節(jié)器,觀察不同層次,判定哪條毛(發(fā))在上方,哪條位于下方。
(二)油鏡的使用練習(xí)
1. 取一張血涂片或取血一小滴,滴于清潔的載玻片一端,另取一張邊緣平整的載玻片,做成血涂片。先用低倍鏡再用高倍鏡進行觀察。
2. 用油鏡觀察,并分辨紅細(xì)胞、白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,比較三種物鏡的放大倍數(shù)和分辨率。
3. 觀察兔脊神經(jīng)節(jié)切片(示固定染色的細(xì)胞)
取兔脊神經(jīng)節(jié)切片標(biāo)本先在調(diào)好光線的低倍鏡下觀察(固定染色的標(biāo)本需調(diào)較亮光線),低倍鏡下找到要觀察的標(biāo)本,為淡紫色的神經(jīng)節(jié)切面,在其外圍包有被膜,且向內(nèi)伸入,形成神經(jīng)節(jié)的結(jié)締組織支架,節(jié)內(nèi)有許多大小不等的神經(jīng)細(xì)胞,呈散在分布。然后轉(zhuǎn)換高倍鏡,選擇完整而清晰的圓形
神經(jīng)細(xì)胞仔細(xì)觀察其內(nèi)部結(jié)構(gòu)??梢姷皆诩?xì)胞中央有一圓形核,核內(nèi)有著色為深紫紅色的圓形核仁及染色質(zhì)顆粒,核與細(xì)胞膜之間是均勻淺紫色的細(xì)胞質(zhì),在細(xì)胞的外面圍有若干個被囊細(xì)胞,它起保護神經(jīng)細(xì)胞的作用。在神經(jīng)細(xì)胞之間還可看到有軸索橫斷面和許多神經(jīng)纖維,多呈交錯排列。
4. 觀察完畢,務(wù)必將油鏡按正確方法擦凈。
偏光顯微鏡物鏡中心調(diào)節(jié)方法
(1)觀察旋轉(zhuǎn)工作臺上的切片,在切片中找一小黑點,使位于目鏡十字線中心。
(2)轉(zhuǎn)動工作臺,若物鏡光軸中心O與工作臺中心不一致,黑點即離開十字線中心繞一個圓轉(zhuǎn)動。圓的中心S即為工作臺的中心。
(3)將小黑點轉(zhuǎn)至距十字線中心遠的1點處,旋轉(zhuǎn)物鏡座上兩個調(diào)節(jié)螺絲使小黑點自1處移至O-1直線的中點(即1點距十字線中心距離的一半)。
(4)如此循環(huán)進行上述三步驟可使物鏡光軸與旋轉(zhuǎn)工作臺中心重合。