等溫核酸試劑盒

TwisAmp Liquid Exo說(shuō)明

以靈活的液體形態(tài)進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光 RNA 擴(kuò)增。若想要將 RPA 與 TwistDx 熒光 TwistAmp? exo 探針結(jié)合使用，則推薦使用本產(chǎn)品。除了基本的組分，還包含強(qiáng)大的核酸酶（核酸外切酶 III），該酶將在擴(kuò)增反應(yīng)期間處理 TwistAmp? exo 探針并產(chǎn)生實(shí)時(shí)讀出。用戶只需提供引物、探針、dNTP 和模板。

非常適用于：實(shí)時(shí)熒光 DNA 檢測(cè)，便于使用不同的 RPA 反應(yīng)體積或改變組分比例

Product code: TALQEXO01

核酸試劑盒是如何工作的？

病毒的基因序列被設(shè)定為檢測(cè)靶點(diǎn)，通過(guò)對(duì)檢測(cè)樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增，因PCR反應(yīng)模板僅為DNA，因此在進(jìn)行PCR反應(yīng)前，應(yīng)將新型冠狀病毒核酸（RNA）逆轉(zhuǎn)錄為DNA，使靶點(diǎn)的DNA序列指數(shù)級(jí)增加，每一個(gè)擴(kuò)增出來(lái)的DNA序列都可以于預(yù)先加入的熒光標(biāo)記探針結(jié)合，產(chǎn)生熒光信號(hào)，擴(kuò)增出來(lái)的靶點(diǎn)基因越多，累積的熒光信號(hào)就越強(qiáng)（就好比演唱會(huì)如果只有一個(gè)粉絲搖熒光棒很不顯眼，如果大家一起搖那就嗨了）。如果樣本中沒有該病毒，自然也就檢測(cè)不到熒光信號(hào)的增強(qiáng)了。

核酸試劑盒

RPA技術(shù)主要依賴于三種酶：能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，反應(yīng)溫度在37°C左右。

重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會(huì)發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動(dòng)DNA合成，對(duì)模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合，防止進(jìn)一步替換。在這個(gè)體系中，由兩個(gè)相對(duì)的引物起始一個(gè)合成事件。整個(gè)過(guò)程進(jìn)行得非?？?/span>，一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴(kuò)增產(chǎn)物。RPA擴(kuò)增的基礎(chǔ)體系(TwistAmp? Basic)含有DNA擴(kuò)增所需的所有試劑，我們只要準(zhǔn)備好引物和模板就行。擴(kuò)增結(jié)果可以通過(guò)凝膠電泳進(jìn)行終點(diǎn)檢測(cè)，產(chǎn)物純化后可用于下游研究。

在這個(gè)基礎(chǔ)體系中添入不同的酶和探針，就可以實(shí)現(xiàn)多樣化的RPA應(yīng)用。舉例來(lái)說(shuō)，TwistAmp? exo結(jié)合了exo探針技術(shù)和核酸外切酶III，能實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)的實(shí)時(shí)讀取，就像熒光定量PCR一樣。不過(guò)反應(yīng)終點(diǎn)的擴(kuò)增子總量有所減少，適合獲得強(qiáng)熒光信號(hào)進(jìn)行動(dòng)力學(xué)分析，不適合終點(diǎn)檢測(cè)(比如跑膠)。將exo探針技術(shù)、核酸外切酶III和逆轉(zhuǎn)錄酶結(jié)合起來(lái)，可以一步實(shí)現(xiàn)RNA模板的實(shí)時(shí)擴(kuò)增。

距離新冠疫情發(fā)生已經(jīng)近4個(gè)月了，不少科研工作者都積極投身到了新冠的相關(guān)研究當(dāng)中……

試紙條是一款基于側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)和膠體金標(biāo)記技術(shù)的即用型快速檢測(cè)試紙條。該款試紙條可用于蛋白、基因擴(kuò)增產(chǎn)物（PCR，LAMP，RPA）的定性/半定量檢測(cè)。研究者需要自行設(shè)計(jì)分別標(biāo)記有生物素的特異性檢測(cè)物（如抗原、探針）和標(biāo)記有FITC的特異性檢測(cè)物（如探針）。