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PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)后的質(zhì)量控制存在缺陷
實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制分為:室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量控制。
室內(nèi)質(zhì)量控制是指實(shí)驗(yàn)室人員通過一定的步驟方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作的可靠性進(jìn)行持續(xù)評(píng)估,旨在監(jiān)控常規(guī)實(shí)驗(yàn)室工作的精度,提高實(shí)驗(yàn)室常規(guī)工作中批內(nèi)、批間樣本檢驗(yàn)的一致性,以確定測定結(jié)果是否可靠及可否發(fā)出報(bào)告的一項(xiàng)工作。
實(shí)驗(yàn)室間質(zhì)量控制是指客觀比較實(shí)驗(yàn)室測量結(jié)果與目標(biāo)值之間的差異,并由外部機(jī)構(gòu)采取一定措施方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果進(jìn)行持續(xù)、客觀的評(píng)價(jià)。
PCR核酸檢測技術(shù)在新冠肺yan疫情檢測中發(fā)揮了重要作用,但由于該技術(shù)將待檢測核酸多次擴(kuò)增,所以非常小污染也容易導(dǎo)致假陽性結(jié)果。PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)中的污染不僅會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量和結(jié)果,還會(huì)危害實(shí)驗(yàn)室工作人員的健康。
PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)完成,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)過程中易發(fā)生污染產(chǎn)生污染主要原因:
① 這也是常見的污染原因。重復(fù)擴(kuò)增后,PCR產(chǎn)物的黏貼遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過PCR的檢測限制,所以即使是少量的污染也足以造成假陽性結(jié)果。
② 試劑的污染。在試劑的配制過程中,接觸了污染的容器、移液器、槍頭、溶液等物導(dǎo)致試劑被污染。
PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)可以是分散或組合的形式。完成一組PCR實(shí)驗(yàn),通常有四個(gè)實(shí)驗(yàn)過程:試劑制備、樣品處理、核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析。如果實(shí)驗(yàn)過程需要,應(yīng)增加樣品粉碎過程。
分散形式PCR實(shí)驗(yàn)室
所謂分散式PCR實(shí)驗(yàn)室,是指完成上述實(shí)驗(yàn)過程的各個(gè)實(shí)驗(yàn)室相互遠(yuǎn)離,分散布置。對(duì)于這種布置形式的PCR實(shí)驗(yàn)室,由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)之間不易相互干擾,因此無需特殊條件要求。