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蛋白質晶體板技術研究
隨著人類基因組計劃的完成,近年來生物大分子的結構與功能研究成為生命科學關注的熱點.晶體學作為結構生物學的基礎,培養(yǎng)出高質量的單晶,對于蛋白質,核酸等生物大分子三維空間結構的測定是至關重要的.文章分析和總結了蛋白質結晶的原理,常用的結晶化方法以及促進蛋白質結晶化技術研究的新進展,蛋白質的分離純化的各種原理和方法作了簡要的概述,同時簡單的介紹了蛋白質結晶的方法及影響因素。
蛋白結晶板研究
再用原子力顯微鏡,磷光成像儀,光密度儀或激光共聚焦掃描儀進行檢測,獲得靶蛋白表達的種類,數量及關聯等信息.蛋白質芯片已經用于研究蛋白質表達譜構成及變化,蛋白質與生物分子(蛋白質,核酸,配體等)的相互作用,抗原體篩選,酶與底物相互作用.蛋白質芯片在醫(yī)學臨床診斷,分析和篩選方面具有潛在的重要應用價值。
蛋白質晶體板
重組蛋白技術在蛋白質結晶、蛋白質、蛋白質相互作用及結構蛋白質組學研究中具有非常重要的作用。當前對重組蛋白的純化,目前常采用固定化金屬離子親和色譜(IMAC)技術,即通過IMAC材料上的金屬離子與組氨酸標簽之間的螯合作用實現帶組氨酸標簽的重組蛋白的純化,但是由于IMAC材料上金屬離子暴露在材料表面,任何能與金屬離子產生螯合作用的蛋白質均獲在IMAC上,如表面富含組氨酸。
因而形核劑的使用對于難結晶蛋白或者起始濃度過低的蛋白質結晶具有重要意義.隨著結構生物學的發(fā)展,形核劑在蛋白質結晶中的研究仍是結晶方法學領域的熱點問題.多孔微球對蛋白質分子的吸附作用有利于無序蛋白質分子團簇的形成,進而促進蛋白質形核.添加多孔微球不但可以增加結晶條件篩選數。
綜述了雜質對蛋白質晶體生長影響研究領域的進展情況, 對可能的雜質來源以及雜質對結晶過程的影響進行了介紹,重點介紹了和結晶蛋白質分子結構相似的雜質分子的影響, 包括晶體成核、生長形態(tài)、表面形貌、生長動力學、質量等,以及雜質在晶體中的重新分配。