廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2005年，位于廣州番禺區(qū)，是集技術(shù)和銷售于一體的企業(yè)。推薦色譜柱——賽分GP-C18色譜柱正相柱:填料是極性的，官能團(tuán)為,CNqing基、,NH2氨基等。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國紐約留學(xué)，歸國創(chuàng)立了聯(lián)方。中西結(jié)合的管理理念，自強(qiáng)不息、開拓進(jìn)取、勤勉擔(dān)當(dāng)，致力于把聯(lián)方打造成一個(gè)百年品牌、一個(gè)z專業(yè)的一站式實(shí)驗(yàn)室采購平臺(tái)，追求質(zhì)量、追求服務(wù)、追求和創(chuàng)新?？茖W(xué)化、精細(xì)化、專業(yè)化。 我們有及時(shí)的送貨服務(wù)，準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。公司主營：Luna色譜柱，美國飛諾美色譜柱，Phenomenex色譜柱，手性色譜柱，Lux多糖類手性色譜柱等等

液相色譜柱選擇方法|液相色譜柱選擇的條件

A填料基質(zhì)

1.硅膠基質(zhì)：純度高本錢低，強(qiáng)度大，化學(xué)修飾輕易，但pH值范圍有限。大多硅膠基質(zhì)填料在pH2-8之間穩(wěn)定，但經(jīng)過特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩(wěn)定在pH1.5-10。推薦色譜柱：BR-C18色譜柱（pH1.5-10.5范圍）

2.聚合物基質(zhì)：應(yīng)用pH值范圍寬，溫度穩(wěn)定(高溫可以達(dá)到80度以上)，機(jī)械強(qiáng)度小。

B顆粒外形

大多現(xiàn)代HPLC填料都是球形顆粒，但有時(shí)是不規(guī)則的顆粒。球形顆粒提供較低的柱壓、較高的柱效和穩(wěn)定性以及較長(zhǎng)的柱壽命在使用高粘度的活動(dòng)相時(shí);不規(guī)則顆粒有較大比表面積和相對(duì)低廉的價(jià)格。

C顆粒粒徑

粒徑越小柱效越高、分離度越高，但同時(shí)會(huì)導(dǎo)致較高柱壓降。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復(fù)雜樣品,UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱。

D含碳量

含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例，與比表面積和鍵合覆蓋度等有關(guān)。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測(cè)試所使用的條件是z佳條件)，只有這樣，測(cè)得的結(jié)果才有可比性。高含碳量進(jìn)步柱容量、分辨率及分析時(shí)間，用于要求高分離度的復(fù)雜樣品;低含碳量分析時(shí)間短、展現(xiàn)不同的選擇性，用于快速分析簡(jiǎn)單樣品及需要高含水活動(dòng)相條件的樣品。一般C18的含碳量在7-19%不等。推薦選擇賽分C18色譜柱。不管你需要做什么樣品，都能夠滿足你的分離條件

E孔徑和比表面積

HPLC吸附介質(zhì)是多孔的顆粒，盡大多數(shù)的反應(yīng)表面于孔內(nèi)。因此，分子必須進(jìn)進(jìn)孔內(nèi)才能被吸附和分離。

孔徑和比表面積是相輔相成的兩個(gè)概念。孔徑小比表面積大，反之亦然。比表面積大，增加樣品與鍵合相之間的反應(yīng)，增加保存,上樣量和復(fù)雜成分的分離度;比表面積小，平衡時(shí)間快，適合梯度分析。

F孔容和機(jī)械強(qiáng)度

孔容，又稱“孔體積”。系統(tǒng)壓力高，可能會(huì)因溶劑泵中的過濾頭供液速度跟不上而導(dǎo)致氣泡進(jìn)入系統(tǒng)，停機(jī)也應(yīng)該是因?yàn)闅馀葸M(jìn)入壓力下降的原因，可考慮更換液體通量更大的過濾頭。指單位顆粒的空隙體積大小。它能很好的反應(yīng)填料的機(jī)械強(qiáng)度?？左w積大的填料相對(duì)孔體積小的填料機(jī)械強(qiáng)度要略弱?？左w積為1.5mL/g或更小的填料大多用于HPLC分離，而孔體積大于1.5mL/g的填料使用于尺寸排阻色譜和低壓色譜。

G封端封端

封端能夠降低極性堿性化合物由于與luo露的硅醇基相互作用而產(chǎn)生的拖尾峰。不封端鍵合相相對(duì)封端鍵合相會(huì)產(chǎn)生不同的選擇性，尤其是極性樣品。

Kinetex液相色譜柱-從 UHPLC 到 HPLC 再到 PREP LC 的完整可擴(kuò)展解決方案

難以置信的 UHPLC

柱效與性能

柱效可比全多孔 1.7 μm

色譜柱高 20 %

在 HPLC 和 UHPLC 系統(tǒng)

上實(shí)現(xiàn)亞 2 μm 級(jí)性能

立即改善您需要 3.5 μm 粒

徑的藥典（歐洲藥典和美

國藥典）方法

在 5 μm 壓強(qiáng)下可以為

HPLC 和 PREP LC 方法實(shí)

現(xiàn) 3 μm 或更佳的柱效

比全多孔顆粒更優(yōu)的性能

使用包含納米結(jié)構(gòu)技術(shù)的溶膠凝膠處理技術(shù)，在固態(tài)硅膠核上培養(yǎng)出均一穩(wěn)定的多孔外殼。這一高度優(yōu)化的工藝與行業(yè)ling先的色譜柱填裝技術(shù)相結(jié)合，催生了可以生成極高塔板數(shù)的高度可重現(xiàn)色譜柱。

廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司主營：Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱，美國飛諾美色譜柱，Phenomenex色譜柱等等。我們不斷追求，通過自身的不斷完善，可以為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)需要的化學(xué)試劑、玻璃儀器、實(shí)驗(yàn)器材和生物耗材，是全方面的實(shí)驗(yàn)室一體化采購平臺(tái)。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神，為您提供價(jià)格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時(shí)的送貨服務(wù)，準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。注意使用溶劑的次序不要顛倒，用jia醇沖洗完后，再以相反的次序沖洗至正己烷，所有的流動(dòng)相必須嚴(yán)格脫水。創(chuàng)業(yè)的路上我們風(fēng)雨同舟，一份耕耘就有一份收獲

更換液相色譜柱該注意哪些問題？

色譜柱作為色譜儀分析系統(tǒng)中的分離單元，色譜柱的分離度對(duì)于色譜儀檢測(cè)分析速率的快慢以及檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性起著至關(guān)重要的作用影響色譜柱分離度的因素有很多，除了色譜柱自身的性能參數(shù)外，在使用液相色譜儀色譜柱分析過程中，尤其要注意的是柱外效應(yīng)對(duì)分析結(jié)果的影響

那么，什么是柱外效應(yīng)？柱外效應(yīng)又是如何造成的呢？液相色譜柱基本構(gòu)造柱管、壓帽/卡套、篩板(濾片)、接頭分析型常規(guī)分析柱窄徑柱(1。?所謂柱外效應(yīng)是指除色譜柱自身性能之外造成色譜峰展寬的因素,其主要由進(jìn)樣裝置檢測(cè)器以及它們與色譜柱之間的連接管路死體積所造成造成柱外效應(yīng)的原因是樣品分子在液體流動(dòng)相中的擴(kuò)散系數(shù)比在氣體中小4~5個(gè)數(shù)量級(jí)，液體流動(dòng)相的流速也比氣相慢1-2個(gè)數(shù)量級(jí)因此，樣品進(jìn)入色譜柱后，在柱子以外的任何死體積（進(jìn)樣器柱接頭連接管檢測(cè)器）中，樣品分子的擴(kuò)散和滯留，都會(huì)引起色譜峰的展寬，而使柱效降低

為使柱外效應(yīng)減至z小，使檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確，液相色譜儀各裝備的管路連接非常重要一般而言，液相色譜儀的次安裝都是由色譜儀廠家技術(shù)員安裝完成的，整個(gè)液相色譜儀及其配套裝備都是安裝的很的客戶后期在更換色譜柱要注意的問題是接頭的處理，一般柱子入口和出口接頭為不銹鋼卡套接頭，當(dāng)完成次安裝后，不銹鋼卡套已固定死，因此，早更換色譜柱時(shí)應(yīng)當(dāng)注意的問題是柱子接頭處的形狀和長(zhǎng)度，否則會(huì)產(chǎn)生一個(gè)非常大的死體積

更換色譜柱的操作方法是先用95%yi腈 5%水沖洗舊柱子（沖去柱子中殘留的緩沖鹽和之前難以洗脫的組分），關(guān)掉流速，待流速降至0后，把柱子兩邊的PEAK頭擰下來，用配套的塞子將換下的柱子兩頭堵上，密封保存更換新的色譜柱時(shí)，應(yīng)先將需換上的柱子兩邊的塞子旋開，確定好柱子標(biāo)示的方向后，先接柱子入口端，并使柱子出口端略高于入口端，這樣就使流動(dòng)相流過柱子時(shí)能將其中的氣泡排出，待氣泡排盡后，再接上柱子的出口端，用純的yi腈小流速?zèng)_洗半小時(shí)，再用流動(dòng)相按0.2， 0.5， 1.0逐漸加大流速來沖洗

LuxAMP 手性液相色譜柱

對(duì)尿液中的jia基ben丙胺和ben丙胺對(duì)映體進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的手性分離

Lux 3μm AMP 是一款專為ben丙胺和取代ben丙胺（包括jia基ben丙胺）的手性分析而開發(fā)和測(cè)試的獨(dú)特液相色譜填料。一旦確定樣品中存在ben丙胺或jia基ben丙胺，便可輕松實(shí)現(xiàn)對(duì)映體確認(rèn)。

不受常見干擾物的影響

Lux 3μm AMP 的另一個(gè)顯著優(yōu)勢(shì)是，在分離ben丙胺和jia基ben丙胺對(duì)映體時(shí)不會(huì)受到下列常見的zhi療和成分的影響。此外，LuxAMP 色譜柱的分離能力也有助于分離取代ben丙胺的對(duì)映體

廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司主營：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。我們不斷追求，通過自身的不斷完善，可以為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、實(shí)驗(yàn)器材、色譜耗材和生物耗材，是quan面的實(shí)驗(yàn)室一體化采購平臺(tái)。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神，為您提供價(jià)格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時(shí)的送貨服務(wù)，準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。曾經(jīng)也有很多同學(xué)和我聯(lián)系討論色譜柱的清洗和再生，所以我之前寫了一篇關(guān)于色譜柱的清洗欠你們的色譜柱清洗再生方法來了）。

GeminipH 靈活性強(qiáng)的液相色譜柱

維生素 B3

色譜柱： Gemini 3 μm C18

規(guī)格： 100 x 4.6mm

貨號(hào)： 00D-4439-E0

流動(dòng)相： A：0.1% 甲酸的水溶液

B：jia醇

流速： 0.6mL/min

溫度： 22 °C

檢測(cè)： 電噴霧質(zhì)譜 (ESMS) (22 °C)

檢測(cè)器： SCIEX API 4000 系統(tǒng)

樣品： 1. 煙酰胺

2. 煙酸

TMP 和硫胺

色譜柱： Gemini 3 μm NX-C18

規(guī)格： 100 x 3.0mm

貨號(hào)： 00D-4453-Y0

流動(dòng)相： A：含 10% jia醇的 25mM Na2

HPO4

(pH 7.0)

B：含 70% jia醇的 25mM Na2

流速： 0.75mL/min

檢測(cè)： 熒光（激發(fā)：375 nm，發(fā)射：435 nm）（室溫）

樣品： 1. TMP

2. 硫胺

手性色譜柱

蛋白質(zhì)型：

蛋白質(zhì)型手性色譜柱屬于第5種類型。分離依賴于疏水相互作用和極性相互作用。已經(jīng)有多種蛋白質(zhì)用于此類手性色譜柱。目前使用較多的是α-酸性糖蛋白（α-Acid Glycoprotein，AGP），人xue清白蛋白（Human Serum Albumin，HSA），牛xue清白蛋白（Bovine Serum Albumin，BSA）和卵類粘蛋白（Ovomucoid，OV）。低含碳量分析時(shí)間短、展現(xiàn)不同的選擇性，用于快速分析簡(jiǎn)單樣品及需要高含水活動(dòng)相條件的樣品。

α-酸性糖蛋白分子由181個(gè)氨基酸殘基和40個(gè)唾液酸（sialic acid）殘基構(gòu)成。α-酸性糖蛋白分子偏酸性，等電點(diǎn)為2.7。含有兩個(gè)二硫鍵，性質(zhì)很穩(wěn)定。α-酸性糖蛋白分子可以共價(jià)鍵合到硅膠上，制成手性色譜柱，可以分離許多化合物。

α-酸性糖蛋白手性色譜柱使用的流動(dòng)相通常為pH 4-7的磷酸鹽緩沖液和很小比例的有機(jī)相。有機(jī)相shou選異bing醇，如達(dá)不到分離要求，可以嘗試yi腈，乙醇，jia醇或四氫fu喃。有機(jī)相的改變導(dǎo)致蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生暫時(shí)的改變。色譜柱的負(fù)載量至關(guān)重要，典型的負(fù)載量為0.02mg/ml的濃度樣品，進(jìn)樣20μl。pH 的改變對(duì)手性選擇性起關(guān)鍵作用，尤其是胺類化合物。但是我們?cè)诓鹦哆^程中對(duì)色譜柱前端填料的損害遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于污染照成的傷害，因?yàn)槲覀儾皇菍I(yè)的。pH降低導(dǎo)致蛋白質(zhì)負(fù)電荷的降低，引起胺類化合物保留時(shí)間減小，然而這意味著可以減小有機(jī)相比例，使選擇性增加，峰形改善。

通過調(diào)節(jié)有機(jī)相比例仍無法達(dá)到分離效果時(shí)，有時(shí)需用電荷調(diào)節(jié)劑。但這可能引起蛋白結(jié)構(gòu)的yong久改變，這些電荷調(diào)節(jié)劑包括丁酸、辛酸、癸酸和二jia基辛胺。有時(shí)也用到1，2 亞二醇，1，2丁醇和氯化鈉。溫度對(duì)分離也有影響，溫度增加保留時(shí)間，減小分離因子。G封端封端封端能夠降低極性堿性化合物由于與luo露的硅醇基相互作用而產(chǎn)生的拖尾峰。

人xue清白蛋白（HSA）分子量為69,000，等電點(diǎn)為4.8。蛋白中認(rèn)為存在兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)：華法令-氮雜普魯帕宗（warfarin-azapropazone）結(jié)合位點(diǎn)。流動(dòng)相中加入辛酸，采用人xue清白蛋白手性色譜柱可以有效分離benzodiazapine。Warfarin也用人xue清白蛋白手性色譜柱得到了分離，流動(dòng)相組成為：100mM磷酸緩沖液pH7：yi腈：異bing醇 = 84：10：6。表面積---------顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和,以m2/gram表示6。

牛xue清白蛋白（BSA）為球型蛋白，分子量為66,000，等電點(diǎn)為4.7。此蛋白為一個(gè)單氨基酸鏈，通過17個(gè)二硫鍵形成9個(gè)雙環(huán)。許多化合物通過牛xue清白蛋白手性色譜柱得到分離。牛xue清白蛋白不如α-酸性糖蛋白穩(wěn)定，一些有ji溶劑（如yi腈、jia醇）可使蛋白變性，因此使用起來要特別注意。Gemini色譜柱簡(jiǎn)介：獨(dú)特的選擇性，高結(jié)構(gòu)整體度和高載量的預(yù)裝柱以及散裝填料非常適合于分離純化應(yīng)用。

卵類粘蛋白由蛋清中提取，分子量為55,000。它可分離大量的胺類和酸類化合物。

蛋白手性色譜柱的載樣量均較小。影響了蛋白手性色譜柱在制備色譜中的應(yīng)用。

蛋白手性色譜柱在所有手性色譜柱中是應(yīng)用廣的色譜柱，但并不是效果z好的色譜柱。

廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2005年，位于廣州番禺區(qū)，是集技術(shù)和銷售于一體的企業(yè)。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國紐約留學(xué)，歸國創(chuàng)立了聯(lián)方。中西結(jié)合的管理理念，自強(qiáng)不息、開拓進(jìn)取、勤勉擔(dān)當(dāng)，致力于把聯(lián)方打造成一個(gè)百年品牌、一個(gè)z專業(yè)的一站式實(shí)驗(yàn)室采購平臺(tái)，追求質(zhì)量、追求服務(wù)、追求和創(chuàng)新。反相色譜中，溶質(zhì)按其疏水性大小進(jìn)行分離，極性越大疏水性越小的溶質(zhì)，越不易與非極性的固定相結(jié)合，所以先被洗脫下來。想了解：Luna色譜柱，美國飛諾美色譜柱，Phenomenex色譜柱，手性色譜柱，Lux多糖類手性色譜柱等信息，可聯(lián)系廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司

Synergi Max-RP 可在極端 pH 條件下實(shí)現(xiàn)重現(xiàn)性和較長(zhǎng)的色譜柱壽命

pH 1.5 下的穩(wěn)定性

應(yīng)用號(hào)：12481

色譜柱： Synergi 4 μm Max-RP

規(guī)格： 30 x 2.0mm

貨號(hào)： 00A-4337-B0

流動(dòng)相： A：含 0.1% TFA 的水溶液

B：含 0.1% TFA 的yi腈溶液

梯度： 在 3 分鐘內(nèi)從 A/B (95:5)

變成 A/B (5:95)

流速： 1.0mL/min

檢測(cè)： UV / 254 nm

進(jìn)樣： 1 μL

溫度： 30 °C

樣品： 沉淀后的豬xue清

（2:1 yi腈:xue清）

內(nèi)含：

1. 奧沙xi泮 (50 ng)

2. 替馬xi泮 (50 ng)

3. 去甲地xi泮 (50 ng)

4. 地xi泮 (50 ng)

配位交換型：

手性配位交換色譜（Chiral LigandExchange Chromatography，CLEC）Davankov發(fā)明，是通過形成光學(xué)活性的金屬絡(luò)合物而達(dá)到手性分離，屬于Irving Wainer分類中的第4類手性固定相，主要用于分離氨基酸類。如果你認(rèn)為流動(dòng)相比例無法把色譜柱沖洗干凈或者此比例中有機(jī)系占有比例過大，你可以使用內(nèi)含10%左右的純水來沖洗。

由于此類固定相是由手性氨基酸—銅離子絡(luò)合物鍵合到硅膠或聚合物上形成，因此流動(dòng)相中必須含有銅離子以保證手性固定相上的銅離子不至流失。其它的過渡金屬元素也已用于手性配位交換色譜，但銅離子應(yīng)用廣。形成絡(luò)合物的過程十分緩慢，因此有時(shí)需提高柱溫，z佳溫度約50℃。手性配位交換色譜僅對(duì)α- 氨基酸和其類似物有效。β- 氨基酸很難用手性配位交換色譜得以分離。但由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強(qiáng)，應(yīng)用范圍受到一定的限制，所以未能廣泛應(yīng)用，新型氧化鋯填料也可用于HPLC，商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱，應(yīng)用PH范圍1～14，溫度可達(dá)100℃。手性配位交換色譜可用于制備，由于流動(dòng)相中存在銅離子，雖然銅離子能用離子交換柱除去，但增加了樣品處理的困難。