大腸菌群的測定意義

糞便污染的指標細菌早在1892年，沙爾丁格(Schardinger)氏首先提出大腸作為水源中病原菌污染的指標菌的意見，因為大腸是存在于人和動物的腸道內(nèi)的常見細菌。一年后，塞烏博耳德“斯密斯(Theobold．Smith)氏指出，大腸因普遍存在于腸道內(nèi)，若在腸道以外的環(huán)境中發(fā)現(xiàn)，就可以認為這是由于人或動物的糞便污染造成的；從此，就開始應(yīng)用大腸作為水源中糞便污染的指標菌。據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，成人糞便中的大腸菌群的含量為：108個／g一109個／g。若水中或食品中發(fā)現(xiàn)有大腸菌群，即可證實已被糞便污染，有糞便污染也就有可能有腸道病原菌存在。根據(jù)這個理由，就可以認為這種含有大腸菌群的水或食品供食用是不安全的。所以目前為評定食品的衛(wèi)生質(zhì)量而進行檢驗時，也都采用大腸菌群或大腸作為糞便污染的指標細菌。當然，有糞便污染，不一定就有腸道病原菌存在，但即使無病原菌，只要被糞便污染的水或食品，也是不衛(wèi)生的，不受人喜歡的。

水中微生物快速檢測儀的基本原理

　　主要包括真空系統(tǒng)、真空快速進換樣系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、離子源、飛行時間質(zhì)量分析器及數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)。原理：激光照射樣品與基質(zhì)形成的共結(jié)晶薄膜，基質(zhì)從激光中吸收能量傳遞給樣品分子，而使樣品氣化電離。離子經(jīng)同一電場加速后，由于其質(zhì)量數(shù)的不同而進入飛行時間質(zhì)量分析器的速度不同得到分離檢測。由于激光能量大部分被基質(zhì)吸收，主要產(chǎn)生分子離子，而較少有碎片離子產(chǎn)生，因此可以直接對蛋白、多肽、DNA等生物大分子進行分析。具備高靈敏度、高準確率、高分辨率和高通量等優(yōu)點，特別適用于生物混合樣品分析。

多管發(fā)酵法測定水中大腸菌群的操作方法

池水、河水或湖水①稀釋水樣：將水樣稀釋成10-1與10-2。②初發(fā)酵：分別吸取1mL10-2、10-1的稀釋水樣和1mL原水樣，注入裝有10mL普通濃度乳糖蛋白胨試管中。另取10mL和100mL原水樣，分別注入裝有5mL和50mL三倍濃縮乳糖蛋白胨水培養(yǎng)基的試管和三角燒瓶中。③以下步驟同上述“自來水”的平板分離和酵試驗。所加水樣體積為100、10、1、0.1mL的發(fā)酵管結(jié)果；水樣體積為10、1、0.1、0.01mL的發(fā)酵管結(jié)果，即得每升水樣中的大腸菌群數(shù)。

濾膜過濾器裝置加水樣過濾

　濾膜過濾器裝置

加水樣過濾：過濾器漏斗內(nèi)加入河水或湖水100mL，加蓋。開動真空泵進行抽濾。抽完后，加入等量的無菌水繼續(xù)抽濾，目的是沖洗漏斗壁。注意：直徑為35mm的濾膜所過濾的水量以培養(yǎng)后長出的菌落數(shù)不多于50個為適宜。一般清潔的深井水或經(jīng)處理過的河水與湖水等可取樣300～500mL；比較清潔的河水或湖水可取樣100mL；嚴重污染的水樣可先進行稀釋；未知的水樣可做3個稀釋度，選擇菌落數(shù)合適的稀釋度進行計算。

平板培養(yǎng)：用無菌鑷子取濾膜邊緣，將沒有細菌的一面緊貼在遠藤氏瓊脂平板或伊紅美藍瓊脂平板上。平板倒置于37℃下培養(yǎng)22～24h，培養(yǎng)結(jié)果。注意：濾膜與培養(yǎng)基之間不得有氣泡。