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發(fā)布時(shí)間:2021-10-12 15:27  






武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;而基因的表達(dá)調(diào)控是在多級(jí)水平上參加的復(fù)雜事件,其中轉(zhuǎn)錄起始是基因表達(dá)的的調(diào)節(jié)環(huán)節(jié),翻譯以及翻譯后加工是基因表達(dá)的基本控制點(diǎn)。公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白P-type ATPase(HMA)已被證實(shí)參與植物體內(nèi)的重金屬運(yùn)輸,HMA5主要參與銅的轉(zhuǎn)運(yùn)。在模式植物擬南芥、水稻和黃瓜中對(duì)HMA5基因進(jìn)行了較多的研究,但是對(duì)豆科植物HMA5的研究鮮見(jiàn)報(bào)道。實(shí)驗(yàn)室前期在天藍(lán)苜蓿中分離到一個(gè)與銅脅迫及共生結(jié)瘤相關(guān)的HMA5基因,為了對(duì)此類(lèi)基因在豆科植物共生結(jié)瘤中的作用進(jìn)行深入研究,本研究對(duì)全基因組已測(cè)序的模式豆科植物蒺藜苜蓿的基因組進(jìn)行篩查,尋找HMA5同源基因并通過(guò)表達(dá)模式分析初步判斷其與共生結(jié)瘤的關(guān)系,在此基礎(chǔ)上,以其中的MTR_8g079250基因?yàn)閷?duì)象,進(jìn)行亞細(xì)胞定位、組織表達(dá)、RNA干擾和過(guò)量表達(dá)等研究,初步鑒定該基因在共生結(jié)瘤中的功能。本研究中,我們了這兩個(gè)EST片段所代表的基因,StRFP和StPUB,并研究了其生物學(xué)功能。1、MTR_8g079250的亞細(xì)胞定位構(gòu)建MTR_8g079250的洋蔥表皮亞細(xì)胞定位載體,通過(guò)基因槍轟擊轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細(xì)胞,在激光共聚焦顯微鏡下觀察到MTR_8g079250::GFP融合蛋白主要在細(xì)胞膜上表達(dá),在細(xì)胞核上也有微量的表達(dá);構(gòu)建MTR_8g079250的葉片亞細(xì)胞定位載體,通過(guò)根癌農(nóng)介導(dǎo)注射葉片的方式進(jìn)行轉(zhuǎn)化,結(jié)果表明目的基因主要定位在細(xì)胞膜和細(xì)胞核上;2、MTR_8g079250的組織表達(dá)構(gòu)建PMTR_8g079250::GUS融合表達(dá)載體,通過(guò)農(nóng)發(fā)根轉(zhuǎn)化的方式轉(zhuǎn)入蒺藜苜蓿根部,經(jīng)培養(yǎng)后,進(jìn)行GUS染色觀察。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;序列分析表明OsSsr1的開(kāi)放閱讀框?yàn)?004bp,編碼一個(gè)由667個(gè)氨基酸組成并含有5個(gè)跨膜區(qū)的蛋白,該蛋白N端含有一個(gè)信號(hào)肽。公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。




柑橘潰瘍病是由地毯草黃單胞柑橘致病變種(Xanthomonas axonopodis pv.citri,Xac)引起的一種病害,可影響大部分的商業(yè)柑橘栽培品種,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。選育抗病品種是解決該病害問(wèn)題的根本途徑,其中,利用基因工程將抗病基因?qū)朐耘嗥贩N是解決柑橘病害的一條快速而有效的途徑。WRKY轉(zhuǎn)錄因子和病程相關(guān)蛋白(pathogenesis-related proteins,PRs)在植物抗病信號(hào)調(diào)控途徑中起著重要作用。Bra1編碼蛋白的氨基酸序列中包含有BAHD?;D(zhuǎn)移酶家族特有的HXXXD功能區(qū)以及DFGWG保守結(jié)構(gòu)域,說(shuō)明Bra1基因是BAHD酰基轉(zhuǎn)移酶基因家族的一個(gè)成員。本研究根據(jù)柑橘潰瘍病高感品種紐荷爾臍橙(Citrus sinensis(L.)Osbeck)和高抗品種四季橘(Citrus madurensis)受潰瘍病侵染后的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),篩選了在這兩個(gè)品種中表達(dá)差異顯著的24個(gè)WRKY和4個(gè)PR基因進(jìn)行研究,在此基礎(chǔ)上,詳細(xì)研究了4個(gè)WRKY基因和2個(gè)PR1基因在柑橘潰瘍病抗性中的功能和作用。具體研究結(jié)果如下:1.候選基因的和生物信息學(xué)分析了Cs WRKY22、Cs WRKY50、Cs WRKY72-1、Cs WRKY72-2、和Cs PR1-1、Cs PR1-2的編碼序列,ORF分別為921bp、480bp、1809bp、1767bp、501bp和480bp。用MEGA5.2軟件分析其與其他植物同家族蛋白氨基酸序列的親緣關(guān)系,并構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)。發(fā)現(xiàn)Cs WRKY22與可可WRKY29,Cs WRKY50與棗WRKY50,Cs WRKY72與可可WRKY72,Cs PR1-1與可可PR-1,Cs PR1-2與龍眼PR-1的親緣關(guān)系較近。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;甘蔗是的糖料作物,甘蔗黑穗病已成為世界性甘蔗主要病害,也是我國(guó)甘蔗栽培上嚴(yán)重的真菌病害,挖掘甘蔗自身抗病基因?qū)共∮N有重要意義。公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。




蘿卜(Raphanus sativus L.)是一種重要的十字花科根菜類(lèi)作物,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,在中國(guó)乃至世界都有廣泛種植。葡萄糖苷是一種重要的植物次生代謝產(chǎn)物,主要存在于蘿卜等十字花科植物中。硫苷及其降解產(chǎn)物在植物防御、風(fēng)味形成以及人類(lèi)預(yù)防中起重要的作用,此外,它還具有作為生物的潛力。磷(Phosphorus,P)是植物生長(zhǎng)發(fā)育必需的大量營(yíng)養(yǎng)元素之一,廣泛地參與到植物體內(nèi)的能量轉(zhuǎn)移、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、光合作用等過(guò)程。MYB轉(zhuǎn)錄因子MYB28、MYB29、MYB76等是硫苷生物合成過(guò)程中的關(guān)鍵調(diào)控基因,其表達(dá)量的多少直接影響蘿卜中硫苷的含量和分布。調(diào)控基因的某些特性在擬南芥、花椰菜、芥菜、小白菜、大白菜等十字花科作物已有廣泛研究,然而在蘿卜研究領(lǐng)域關(guān)于MYB28和MYB29的分子特性、表達(dá)特征尚未見(jiàn)報(bào)道。因此,本以蘿卜品種'NAU-ZQH'為材料,通過(guò)比對(duì)擬南芥中MYB28和MYB29的序列與本實(shí)驗(yàn)室蘿卜轉(zhuǎn)錄組序列,蘿卜中調(diào)控硫苷合成的兩個(gè)關(guān)鍵基因RsMYB28和RsMYB29,之后從亞細(xì)胞定位、轉(zhuǎn)錄活性和表達(dá)特征等多方面進(jìn)行研究,以期,增加對(duì)蘿卜中RsMYB28和RsMYB29基因分子特性和表達(dá)特征的認(rèn)識(shí),為后期通過(guò)基因改良培育出硫苷含量較高的蘿卜新品種提供理論基礎(chǔ)。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;方法構(gòu)建2種GFP標(biāo)簽蛋白質(zhì)表達(dá)載體,分別在GFP的N和C端預(yù)留位點(diǎn),以目的基因。公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





采用根癌農(nóng)介導(dǎo)的方法,以農(nóng)介導(dǎo)絲狀真菌遺傳轉(zhuǎn)化的載體PCH-sGFP對(duì)尖孢鐮刀菌甘藍(lán)專(zhuān)化型兩個(gè)生理小種進(jìn)行轉(zhuǎn)化,該載體含有報(bào)告基因—綠色熒光蛋白基因(gfp)和篩選基因—潮磷酸轉(zhuǎn)移酶基因(hph).獲得轉(zhuǎn)化菌株后,經(jīng)檢測(cè)表明:T-DNA目的片段成功整合到枯萎病菌基因組中,并且單孢繼代培養(yǎng)6代后熒光蛋白仍能穩(wěn)定遺傳.對(duì)轉(zhuǎn)化菌株的生長(zhǎng)速度和致病力進(jìn)行分析,結(jié)果表明:菌株和轉(zhuǎn)化菌株在生長(zhǎng)速度和致病力上沒(méi)有顯著差異.因此,轉(zhuǎn)化菌株可用于甘藍(lán)枯萎病菌的組織病理學(xué)研究.


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