廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務(wù)包括：非洲病毒檢測(cè)、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測(cè)、非洲檢測(cè)、全自動(dòng)核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測(cè)試劑盒。我們的客戶對(duì)象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)豬場(chǎng)、屠宰場(chǎng)、生豬屠宰場(chǎng)。但磁珠法由于磁珠吸附DNA分子的不均衡、且在后續(xù)洗脫過(guò)程中會(huì)造成核酸的斷裂和損失，因此在疑難檢材的檢驗(yàn)過(guò)程中，存在PCR擴(kuò)增失敗，DNA檢驗(yàn)不成功的情況。

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一個(gè)豬場(chǎng)對(duì)進(jìn)場(chǎng)人員的衣物進(jìn)行熏蒸消毒，專門制作了一個(gè)消毒柜，但由于開始設(shè)計(jì)不理想，消毒柜太大，無(wú)法進(jìn)入屋內(nèi)，就放在了舍外。夏秋季節(jié)消毒沒(méi)什么問(wèn)題，但到了冬天，他們?nèi)匀辉谏嵬庋粝?，這樣的效果是很差的。還有的在入舍消毒池中，只是例行把水和火堿放進(jìn)去，也不攪拌，火堿靠自身溶解需要較長(zhǎng)時(shí)間，那剛放好的消毒水的作用就不確實(shí)了。另外，熒光定量PCR的結(jié)果無(wú)需通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)評(píng)估，大大節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間，提高實(shí)驗(yàn)效率。

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現(xiàn)有數(shù)據(jù)表明，在豬日糧中，豬流行性腹瀉病毒和其他外來(lái)病毒等能很好存活的原料包括：豆粕、酒糟、豬源蛋白質(zhì)、維生素預(yù)混料、氨化膽i堿、L-賴氨酸和DL-蛋氨酸。如果其他尚未被評(píng)估的原料符合以下標(biāo)準(zhǔn)就更有利于病毒存活：蛋白質(zhì)含量高（特別是天然蛋白質(zhì)）、豬源、相對(duì)表面積較大質(zhì)量（比）、含有載體的微成分。值得注意的是，這些原料并非具有相同的污染風(fēng)險(xiǎn)。注意：這里說(shuō)的時(shí)間，不單純是消毒所用的時(shí)間，更重要的是病原體與消毒i藥接觸的有效時(shí)間。

廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務(wù)包括：非洲病毒檢測(cè)、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測(cè)、非洲檢測(cè)、全自動(dòng)核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測(cè)試劑盒。因而,借助PCR對(duì)基因快速、敏感、特異而準(zhǔn)確的定量成為目前分子生物學(xué)技術(shù)研究的熱點(diǎn)之一。我們的客戶對(duì)象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)豬場(chǎng)、屠宰場(chǎng)、生豬屠宰場(chǎng)。

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PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；剛開始時(shí), 探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。但在PCR反應(yīng)中,由于模板、試劑、焦磷酸鹽分子的聚集等因素影響聚合酶反應(yīng),最終導(dǎo)致PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式進(jìn)行而進(jìn)入“平臺(tái)期”,而且一些反應(yīng)的終產(chǎn)物比另一些要多,因此終點(diǎn)PCR反應(yīng)方法定量并不準(zhǔn)確。

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實(shí)時(shí)熒光定量PCR的出現(xiàn)，極大地簡(jiǎn)化了定量檢測(cè)的過(guò)程，而且真正實(shí)現(xiàn)了絕i對(duì)定量。多種檢測(cè)系統(tǒng)的出現(xiàn)，使實(shí)驗(yàn)的選擇性更強(qiáng)。自動(dòng)化操作提高了工作效率，反應(yīng)快速、重復(fù)性好、靈敏度高、特異性強(qiáng)、結(jié)果清晰。如采用常規(guī)的終點(diǎn)檢測(cè)法（利用EB染色來(lái)判斷擴(kuò)增產(chǎn)物的多少，從而間接的判斷起始拷貝量），即使起始模板量相同經(jīng)PCR擴(kuò)增、EB染色后也完全有可能得到不同的終點(diǎn)熒光信號(hào)強(qiáng)度。隨著生物芯片技術(shù)和熒光探針定量技術(shù)的結(jié)合，熒光定量PCR在醫(yī)學(xué)檢測(cè)及其他各個(gè)領(lǐng)域中的應(yīng)用前景將更加廣闊，令人欣喜。盡管如此我們也應(yīng)清晰認(rèn)識(shí)到，F(xiàn)Q-PCR技術(shù)在我國(guó)各個(gè)研究領(lǐng)域的應(yīng)用并不多見，這就需要我國(guó)學(xué)者迎頭趕上，使FQ-PCR技術(shù)更充分地i推廣，以推動(dòng)研究工作的快速發(fā)展。

廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務(wù)包括：非洲病毒檢測(cè)、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測(cè)、非洲檢測(cè)、全自動(dòng)核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測(cè)試劑盒。廣州勱博--博日病毒核酸提取系統(tǒng)在PCR擴(kuò)增中，溶液中的模板變性后低溫退火時(shí)，引物與探針同時(shí)與模板結(jié)合。我們的客戶對(duì)象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)豬場(chǎng)、屠宰場(chǎng)、生豬屠宰場(chǎng)。

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相對(duì)定量可以對(duì)每個(gè)樣本中模版的其實(shí)水平之間的差異進(jìn)行精i確比較，沒(méi)必要知道模版的確切拷貝數(shù)，并且樣本模板中的相對(duì)水平不用使用標(biāo)準(zhǔn)曲線就可以確定。相對(duì)定量分析以實(shí)時(shí)PCR方式執(zhí)行，在實(shí)時(shí)PCR分析過(guò)程中，PCR基因擴(kuò)增一直在監(jiān)控中，在PCR進(jìn)行期間進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，而不是在PCR結(jié)束時(shí)（終點(diǎn)PCR）才獲取數(shù)據(jù)。如果生產(chǎn)者認(rèn)可排除豬源原料是可行的，那么還應(yīng)該考慮到那些間接的豬源原料，像添加劑、基礎(chǔ)混合物和那些可能源于豬源的動(dòng)物蛋白或脂肪等。在實(shí)時(shí)PCR中，反應(yīng)是在目標(biāo)的擴(kuò)增早被監(jiān)測(cè)到時(shí)用循環(huán)中的時(shí)間點(diǎn)來(lái)描述的，而不是在PCR結(jié)束時(shí)通過(guò)目標(biāo)的累計(jì)數(shù)來(lái)描述。

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在PCR反應(yīng)體系中，加入過(guò)量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料非特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號(hào)，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào)，從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。此外，用real-timeQ-PCR來(lái)研究mRNA時(shí)，受到不同RNA樣本存在不同的逆轉(zhuǎn)錄（RT）效率的限制。SYBR僅與雙鏈DNA進(jìn)行結(jié)合，因此可以通過(guò)溶解曲線，確定PCR反應(yīng)是否特異。

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核酸的提取和純化是法醫(yī)DNA物證檢驗(yàn)的關(guān)鍵技術(shù)之一，目前實(shí)驗(yàn)室i常用的方法包括核酸純化柱（Spin column）磁珠法和clean-up系統(tǒng)，磁珠法由于操作簡(jiǎn)便、快速，能夠提取到高純度的核酸DNA,并且可以自動(dòng)化，因此成為目前法醫(yī)DNA實(shí)驗(yàn)室核酸提取純化的主要手段。廣州勱博--生豬屠宰場(chǎng)PCR熒光定量PCR最早稱TaqManPCR，后來(lái)也叫Real-TimePCR，是美國(guó)PE（PerkinElmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。但磁珠法由于磁珠吸附DNA分子的不均衡、且在后續(xù)洗脫過(guò)程中會(huì)造成核酸的斷裂和損失，因此在疑難檢材的檢驗(yàn)過(guò)程中，存在PCR擴(kuò)增失敗， DNA檢驗(yàn)不成功的情況。

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對(duì)豬場(chǎng)實(shí)行非瘟檢測(cè)，并不是說(shuō)要每天/每次都要進(jìn)行檢測(cè)，而是基于豬場(chǎng)各區(qū)域/途徑的風(fēng)險(xiǎn)程度制定合適的檢測(cè)頻率，高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域檢測(cè)頻率相對(duì)而言要高些，如引種/車輛/精i液，建議每次采樣檢測(cè)，采購(gòu)飼料/物資產(chǎn)品，建議先試用并隔離做檢測(cè)，其余定期監(jiān)測(cè)，檢測(cè)頻率可按每月或每周進(jìn)行，具體可根據(jù)本場(chǎng)實(shí)際情況而定，可按照?qǐng)鰞?nèi)所劃分的管理單元格進(jìn)行全i方位的篩選，從而降低疾病傳入風(fēng)險(xiǎn)。廣州勱博--冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠核酸提取純化一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。