三羥氨基CAS77-86-1，就是通常所說的Tris，也叫氨，是一種很常用的試劑，在工業(yè)合成、生化檢測(cè)、生物制藥領(lǐng)域都有廣泛應(yīng)用；在采樣管病毒保存液中，屬于其配置溶液的一種重要的原料。三羥氨基Tris分子結(jié)構(gòu)中含有一個(gè)氨基和三個(gè)醇羥基，氨基和三個(gè)羥圍繞中心碳原子形成類似的四面體結(jié)構(gòu)。由于氨基的存在，Tris在水溶液中顯弱堿性，氨基可作為配位基團(tuán)和很多酸形成Tris鹽，常見的有Tris-HCl，還有TEA、TEB、Tris甘氨酸、Tris磷酸等。病毒保存液中用的原料Tris和EDTA，實(shí)際TE緩沖液就是Tris加EDTA。

首先，什么是緩沖溶液？緩沖液（Buffer solution）通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩沖對(duì)所組成的溶液，能夠在加入一定量其他物質(zhì)時(shí)減緩pH的改變。以生物實(shí)驗(yàn)中的一種緩沖液PBS為例，是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對(duì)，在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強(qiáng)的緩沖能力。

01、緩沖原理

假設(shè)緩沖溶液里含有弱酸HA以及它的共軛堿  。

 總的來說，TCEP是這三個(gè)還原劑中穩(wěn)定的，但它也是昂貴的。我通常在純化過程的緩沖液中添加DTT，在后保存酶液的緩沖液中添加TCEP。一般比較合理的還原劑濃度是5~10mM。基本上你要確保還原劑濃度要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于你的蛋白濃度。因?yàn)镈TT和巰在室溫下就會(huì)降解，所以需要將添加了還原劑的緩沖液處于低溫保藏，或者在使用時(shí)再添加還原劑。