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蛋白結(jié)晶自動(dòng)化
1.能夠進(jìn)行多種不同方法的加樣:氣相擴(kuò)散法(包括坐滴法和懸滴法); 2.坐滴懸滴蛋白以及篩選液的加樣針頭為八通道,針頭必須可自動(dòng)清洗重復(fù)使用,也必須可自動(dòng)更換; 3.儀器具有全自動(dòng)濕度控制功能,儀器內(nèi)部帶有濕度感應(yīng)器,實(shí)時(shí)控制濕度,并且軟件界面實(shí)時(shí)顯示濕度數(shù)據(jù),有效控制樣本液體揮發(fā),提高實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性;(gryphon沒這個(gè)功能) 4.至少有三個(gè)微孔板位和一個(gè)深孔板位;后期能擴(kuò)展升級(jí),增加樣本池液整板分配功能,可自動(dòng)從深孔板分配到微孔板。 5.八通道加樣頭須具備獨(dú)立傳感器,確保點(diǎn)樣,并有效防止漏點(diǎn)和誤操作,更好地適應(yīng)板面高低不平產(chǎn)生的誤差; 6. 大和小加樣容量:坐滴盤和懸滴盤:60nL – 1200nL; 7.加樣時(shí)間:96孔標(biāo)準(zhǔn)盤(坐滴盤和懸滴盤):≤5分; 8.兼容市面上所有的96孔標(biāo)準(zhǔn)盤(坐滴盤和懸滴盤); 9.加樣精度:無論液體種類和粘度100nl時(shí)CV=5%; 10.加樣模式:可以一次吸取多次加樣; 11.機(jī)械定位精度:Z方向=50um; X, Y方向200um; 12.加樣區(qū)域完全封閉,無外界干擾。
蛋白結(jié)晶板
蛋白質(zhì)溶液和含有沉淀劑的溶液是彼此分層在一個(gè)有小孔的毛細(xì)管中,一個(gè)測(cè)熔點(diǎn)用的毛細(xì)管一般即可(如圖1.2)。下層是密度大的溶液,例如銨或PEG溶液。如果如MPD被用作沉淀劑,它會(huì)在上層。以1:1混合,沉淀劑的濃度應(yīng)該是所期終濃度的二倍。兩種溶液(各自約5μl)通過針頭導(dǎo)入毛細(xì)管,先導(dǎo)入下層的。通過一個(gè)簡(jiǎn)易的搖擺式離心機(jī)去除氣泡。再加入上層,進(jìn)而兩層之間形成一個(gè)明顯的界面。
盡管近些年來在蛋白質(zhì)結(jié)晶的理論、方法和技術(shù)上已取得巨大發(fā)展,獲得衍射良好的蛋白質(zhì)晶體仍然是利用X-射線解析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的一個(gè)主要瓶頸問題。這里我們發(fā)展了一種新型的蛋白質(zhì)結(jié)晶方法—固液界面方法,即SLIM。該方法主要包括兩個(gè)部分1)預(yù)先加入并干燥蛋白質(zhì)母液;2)進(jìn)行晶體生長(zhǎng)的時(shí)候,直接將蛋白質(zhì)溶液加入'干母液'中,從而產(chǎn)生一個(gè)固體(干母液)和液體(蛋白質(zhì)溶液)的界面。該方法不僅操作簡(jiǎn)單、快速,而且降低了對(duì)蛋白質(zhì)溶液濃度的要求。