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酶底物法 ( enzyme substrate technique)的原理是 :利用大腸菌群細(xì)菌能產(chǎn)生β2半乳糖苷酶 (β2D2galactosidase)分解 ON 2PG (O rtho2 nitrophenyl2β2D2galactopyranoside ) 使培養(yǎng)液呈黃色 ,檢測(cè)水樣中是否含有大腸菌群。利用大腸埃希菌產(chǎn)生 β2葡萄 糖 醛 酸 酶 ( β2glucuronidase ) 分 解 MUG ( 42 methyl2umbelliferyl2β2D2glucuronide)使培養(yǎng)液在波長(zhǎng) 366 nm紫外光下產(chǎn)生藍(lán)色熒光 , 檢測(cè)水樣中是否含有大腸埃希菌。酶底物法有商品化試劑供應(yīng) ,實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)便 ,無(wú)需確認(rèn)試驗(yàn) ,可同時(shí)檢測(cè)水樣中大腸菌群和大腸埃希菌。如果改變培養(yǎng)溫度 ,還可檢測(cè)耐熱大腸菌群。該方法檢測(cè)周期短 , 18 ~24 h 即可報(bào)告結(jié)果。可見該方法較大的特點(diǎn)是節(jié)省了時(shí)間和人力。
怎樣檢測(cè)飲用水中的大腸菌群?
(一)水樣的采集
自來(lái)水取樣:應(yīng)在水龍頭打開放水5分鐘,再用無(wú)菌容器接取水樣,待分析。如水樣內(nèi)含有余氯,則采樣瓶滅菌后按每五百毫升水樣加百分之三Na2S2O3.5H2O溶液一毫升。
(二)初發(fā)酵試驗(yàn)
1.水樣稀釋:制備水樣10-1、10-2的稀釋液,方法為用無(wú)菌移液管吸取水樣10mL放于盛有90mL無(wú)菌水和若干玻璃珠的錐形瓶中,充分振蕩使混合均勻,并使其中的細(xì)菌盡量呈單個(gè)存在,即為10-1稀釋液;再?gòu)?0-1制備10-2稀釋液
2.接種和培養(yǎng):以無(wú)菌操作于5支三倍濃縮培養(yǎng)基中各加入水樣10mL,5支普通培養(yǎng)基試管中加入水樣1mL,5支普通培養(yǎng)基試管中加入10-1稀釋液1mL,小心混勻放入37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。此即5管法。
3.結(jié)果觀察:37℃中培養(yǎng)24h后取出觀察,觀察有無(wú)氣體和酸產(chǎn)生。在48h之間,培養(yǎng)管內(nèi)倒置的杜漢氏小管內(nèi)有任何量的氣體積累,或培養(yǎng)基顏色從紫色變?yōu)辄S色,便可初步斷定為陽(yáng)性反應(yīng)。
使用智能程控定量封口機(jī)時(shí)應(yīng)該注意哪些操作規(guī)程
操作說(shuō)明
1、檢查電源是否相符
2、打開電源開關(guān),橙黃色指示燈應(yīng)當(dāng)涼氣
3、程控定量封口機(jī)需要預(yù)熱直到綠色指示燈亮起,由于受工作條件和環(huán)境溫度等因素影響,綠燈啟動(dòng)時(shí)間按范圍大約10-30分鐘。只有當(dāng)兩個(gè)燈都亮?xí)r,才能說(shuō)明機(jī)器達(dá)到工作溫度。
4、把橡膠墊放在進(jìn)口托盤架上,有大矩形孔的一端在外。
5、把裝有樣品和DST試劑的定量盤放入橡膠墊中,注意定量盤的每個(gè)凹陷要對(duì)準(zhǔn)橡膠墊上對(duì)應(yīng)的空。
6、向機(jī)器方向輕輕推動(dòng)橡膠墊,直到機(jī)器抓住橡膠墊,并帶動(dòng)其進(jìn)入機(jī)器。
7、大約15秒鐘,定量托盤封口完成,從機(jī)器后出來(lái)。請(qǐng)從機(jī)器后拿出橡膠墊和定量托盤。
8、任何時(shí)候,如果需要時(shí)機(jī)器反轉(zhuǎn),從前面退出橡膠墊(例如當(dāng)定量托盤沒放平就將橡膠墊放入機(jī)器),請(qǐng)按反轉(zhuǎn)鈕。但是,當(dāng)橡膠墊已經(jīng)完全進(jìn)入機(jī)器中,請(qǐng)不要按反轉(zhuǎn)開關(guān)。
9、如有多個(gè)橡膠墊,可以連續(xù)放入機(jī)器。
清洗
1、橡膠墊可以放到高壓消毒鍋中進(jìn)行消毒,也可以用家用漂白fen清洗。
2、一般情況下可以使用柔軟的干布清洗封口機(jī)外殼。也可以用家用漂白fen清洗,注意個(gè)人防護(hù)。
3,只有專門zhi定人員才可以打開封口機(jī)的前置蓋。
更換保險(xiǎn)絲
保險(xiǎn)管在機(jī)器后部,電源插座的上段。如果需要更換保險(xiǎn)管,請(qǐng)先關(guān)閉封口機(jī)電源,拔下電源線。使用4安培的保險(xiǎn)管。
保養(yǎng)
1、只有經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的人員才可以對(duì)機(jī)器進(jìn)行保養(yǎng)。
2、保養(yǎng)前機(jī)器必須要斷電冷卻90分鐘
3、如果在必需在機(jī)器冷卻前打開,請(qǐng)注意不要接觸上磙
4、不要使水進(jìn)入機(jī)器內(nèi)