大腸菌群檢驗(yàn)方法

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)采用三步法，即：乳糖發(fā)酵試驗(yàn)、分離培養(yǎng)和證實(shí)試驗(yàn)。　　乳糖發(fā)酵試驗(yàn)：樣品稀釋后，選擇三個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。36±1℃培養(yǎng)48±2h，觀察是否產(chǎn)氣。

　　分離培養(yǎng)：將產(chǎn)氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，36±1℃培養(yǎng)18-24h，觀察菌落形態(tài)。

　　證實(shí)試驗(yàn)：挑取平板上的ke疑菌落，進(jìn)行革蘭氏染色觀察。同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管36±1℃培養(yǎng)24±2h，觀察產(chǎn)氣情況。

　　報(bào)告：根據(jù)證實(shí)為大腸桿菌陽(yáng)性的管數(shù)，查MPN表，報(bào)告每100ml（g）大腸菌群的MPN值。

大腸菌群并非細(xì)菌學(xué)分類命名，而是衛(wèi)生細(xì)菌領(lǐng)域的用語(yǔ)，它不代表某一個(gè)或某一屬細(xì)菌，而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關(guān)的細(xì)菌，這些細(xì)菌在生化及xue清學(xué)方面并非完全一致，其定義為：需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌。一般認(rèn)為該菌群細(xì)菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產(chǎn)氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。

酶底物法相比多管發(fā)酵法、濾膜法的優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)：酶底物法為GB5750-2006收錄的用于大腸桿菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)方法，酶底物法是目前水中大腸桿菌檢測(cè)的先進(jìn)方法，目前以其方便快捷，假陽(yáng)性低，適用大量樣品快速檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)正逐步被國(guó)內(nèi)檢測(cè)部門所認(rèn)可。相對(duì)于多管發(fā)酵和濾膜法，酶底物法檢測(cè)步驟大大減少，而且對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求不高，檢測(cè)時(shí)間可減少到24小時(shí)，在日常水樣監(jiān)測(cè)及應(yīng)急監(jiān)測(cè)中具有很好的應(yīng)用前景，可及時(shí)檢測(cè)，預(yù)防，較大限度的減少重大公共安全事故的發(fā)生幾率。

程控定量封口機(jī)操作規(guī)程

1.將電源開(kāi)關(guān)及機(jī)身背后開(kāi)關(guān)打開(kāi)，橙黃色指示燈亮，儀器開(kāi)始加熱。

2.10-30分鐘（時(shí)間受環(huán)境溫度及工作條件等因素影響）后，預(yù)熱完成，綠色指示燈亮，儀器達(dá)到封口溫度可進(jìn)行封口操作。

3.把裝有樣品和Colitech試劑的定量盤放置在進(jìn)樣口。

4.向儀器方向輕輕推送定量盤，儀器感應(yīng)后會(huì)自動(dòng)進(jìn)樣，帶動(dòng)其進(jìn)入封口。

5.整個(gè)進(jìn)樣過(guò)程大概持續(xù)15秒。定量盤封口完成后，會(huì)從儀器后方送出，從后方拿取定量盤即可。

6.如果有多個(gè)定量盤待封口，可進(jìn)行連續(xù)封口，中間間隔十幾秒種即可。

7.如果遇到類似定量盤未放平就進(jìn)樣的狀況，可點(diǎn)擊反轉(zhuǎn)按鈕進(jìn)行儀器反轉(zhuǎn)。如果定量盤已完全進(jìn)入儀器，則不可進(jìn)行反轉(zhuǎn)操作。

8.使用完畢后，關(guān)閉儀器電源并拔下電源線。