組織研磨儀使用注意事項(xiàng)

以下內(nèi)容是由北京駿騰斯瑞有限公司提供，希望對(duì)同行業(yè)有所幫助！
      研磨一定時(shí)間后，將工件調(diào)轉(zhuǎn)90°-180°，以防工件傾斜。每次用完后，必須要拿下拋光墊，這樣做是為了防止拋光墊損壞。

使用后，建議用熱水清潔一下拋光墊，及時(shí)清理機(jī)座，擦拭清除拋光劑和灰塵，污垢，必須要纏繞在懸掛鉤上，再用濕抹布擦拭一下電源線表面層，如果發(fā)現(xiàn)電源線損壞，要及時(shí)更換，不能再使用。

組織研磨儀的產(chǎn)品特點(diǎn)

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      1.操作數(shù)量多，效果好，快速的工作可以在三十幾秒內(nèi)完成192*2ml個(gè)樣品的研磨。省時(shí)省力，批間，批內(nèi)差異小。抽提的蛋白活性更高，核酸片斷更長。

2.無交叉污染，研磨罐在破碎過程中處于全封閉狀態(tài)，可采用一次性離心管和珠子。樣品完整保留在罐內(nèi)，避免樣品間的交叉污染以及外界污染。

3.操作簡便，人性化操作界面（觸摸屏），內(nèi)置程序控制器，可對(duì)研磨時(shí)間、轉(zhuǎn)子的振動(dòng)頻率等參數(shù)進(jìn)行設(shè)置。

4．重復(fù)性好，同一組織樣本設(shè)定相同程序，獲得相同的研磨效果。工作時(shí)間短，樣本溫度不會(huì)上升

5.無易損件設(shè)計(jì)，電磁鎖定保護(hù)

6.不銹鋼內(nèi)腔，清潔消毒方便

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DNA的粗提

1) 將高通量組織研磨儀研磨好的樣品取出于65℃水浴45min，中途間隔（輕柔）振蕩三次混勻；

2) 冷卻后加入等體積：易戊醇（24：1），輕柔顛倒混勻使乳化10min；

3) 7000g-8000g離心10min（18-20℃）；

4) 吸取上清于另一干凈的離心管中；

5) （根據(jù)需要可用氯放：易戊醇如上法重復(fù)抽提一次，吸取上清）；

6) 加入與上清液等體積

7) 離心法沉淀DNA；

8) 在75%乙醇中漂洗DNA數(shù)分鐘以上，用Tip頭吸干乙醇；

9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次；

10) 沉淀于室溫或64℃以下的恒溫箱中干燥片刻至剛出現(xiàn)半透明，不要過度干燥；

11) 用50μlTE溶解沉淀，可用65℃水浴助溶，DNA粗提物可用于粗略PCR等。

利用高通量組織研磨儀對(duì)要進(jìn)行DNA提取的植物樣品研磨的好處在于：研磨過程中，不會(huì)對(duì)植物組織造成破壞，可根據(jù)需要選擇干磨、濕磨及冷凍研磨，封閉式的樣品管，避免樣品交叉污染。

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每50～100mg 組織加入0.2體積 TRIzol

1.加鋼球1顆,設(shè)置研磨儀參數(shù)：12單位振頻,1min,每種樣品基本充分勻漿

2. 將上述勻漿液每0.2體積 TRIzol 試劑用量的勻漿液中加入0.04體積氯方，蓋緊管蓋，手動(dòng)劇烈震搖15 秒鐘，然后室溫靜置2～3 分鐘。

3. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。

4. 小心吸取上層水相（無色）加入到新試管中，同時(shí)計(jì)算所吸取的水相體積。不必過多吸取，防止吸入DNA和蛋白雜質(zhì)（中間層，白色）。

5. 加入所吸取水相等體積預(yù)冷的異丙淳，蓋緊管蓋，輕輕搖勻。

6. 室溫靜置10 分鐘，待RNA 充分沉淀（為減少RNA 降解，此步驟可省略）。

7. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。

8. 將上清棄除（注意別丟棄沉淀），每管加入0.2體積75%乙醇潤洗，蓋緊管蓋，輕輕晃動(dòng)試管，以去除殘留的異丙淳和鹽份。4℃ 7,500g 離心5 分鐘。

9. 將上清棄除（注意別丟棄沉淀），打開管蓋，將RNA 沉淀干燥（室溫?fù)]發(fā)或真空干燥）。注意RNA 沉淀不可完全干燥，否則難以溶解。

10. 將RNA 沉淀溶解于適量的無RNase 水中。如果RNA 沉淀溶解不完全，將使OD260/OD280≤1.6。此RNA 溶液可用于進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)，或者-70℃保存。