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ELISA試劑盒的分類
檢測抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。
Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
將目標(biāo)包被于微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的結(jié)合,然后加入微生物化的目標(biāo),將未結(jié)合的生物素洗凈后,加入HRP標(biāo)記和親和素,再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。
Elisa試劑盒——Elisa實(shí)驗(yàn)常見問題及解決方案
現(xiàn)白板,陽性對照不顯色
1 顯色液變質(zhì) 更換新的顯色液
2 洗滌液配制有誤 請按說明書所示稀釋倍數(shù)配制
3 未加酶結(jié)合物而認(rèn)為已加入 注意不要漏加
4 終止液誤作洗滌液稀釋或當(dāng)?shù)孜镆菏褂?每次加液前均應(yīng)看清標(biāo)簽
5 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋方法錯(cuò)誤/或標(biāo)準(zhǔn)品有問題 請按照說明書所示配置說明書,注意單位和稀釋倍數(shù)
6 不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑混用 建議使用同批次試劑盒。不能混用不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑。