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以下列出了一些色譜柱的清洗溶劑和順序，作為參考：以正已烷(或庚烷)、和的硅膠柱依次沖洗，然后按相反的順序沖洗，所有的溶劑必須嚴(yán)格脫水?？梢郧逑吹魵埩舻膹?qiáng)極性雜質(zhì)，并對(duì)硅膠表面進(jìn)行活化。反相柱用水、、、(或)依次沖洗，然后按反序沖洗。若下一步分析所用的流動(dòng)相不含緩沖液，就可以忽略一步用水沖洗?？上慈埩舻姆菢O性雜質(zhì)，多次在()沖洗時(shí)多次注射100-200μ l四氫，有助于去除強(qiáng)疏水性的雜質(zhì)。四氫與或混合溶液可去除類(lèi)脂。有時(shí)候還要注射幾次二甲砜。用0.1%的、、三梯度洗脫可去除蛋白質(zhì)污染。用稀酸緩沖洗陽(yáng)離子交換柱，用稀堿緩沖液沖洗，把交換性能很強(qiáng)的鹽去掉，再用水、、(除去固定相表面吸附的有機(jī)物)、、水，依次沖洗。

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保存色譜柱時(shí)，柱中應(yīng)充滿(mǎn)或，柱連接處應(yīng)緊固，防止溶劑揮發(fā)干燥。請(qǐng)勿將緩沖液留在柱內(nèi)待一夜或更久。8、在使用色譜柱時(shí)，如果壓力升高，有一種可能是燒結(jié)過(guò)的濾片被堵塞，此時(shí)應(yīng)更換濾片或取出清洗；還有一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi)，使柱頭受到污染；如果柱效降低或色譜峰變形，可能會(huì)出現(xiàn)柱頭塌陷，體積增大。當(dāng)出現(xiàn)后兩種情況時(shí)，小心將柱頭接頭擰開(kāi)，用潔凈的小鋼將柱頭填料取出1~2 mm的高度(注意將污染的填料取凈)再將柱內(nèi)填料整平。接著將其填充到色譜柱中，用合適的溶劑潤(rùn)濕固定相(與柱相同)，壓平，然后擰緊柱接頭。這種處理后柱的效能有所提高，但難以恢復(fù)到新柱水平。柱失效一般為柱端，在分析柱前安裝與分析柱相同固定相的短柱(5-30毫米)，可起到保護(hù)、延長(zhǎng)柱壽命的作用。使用保護(hù)柱會(huì)失去一些柱效，這是值得的。

色譜柱一般用硅膠作基質(zhì)，只能在pH2-9的范圍使用。柱使用一段時(shí)間后，可能會(huì)有一些吸附作用強(qiáng)的物質(zhì)留在柱頂，尤其是一些有色物質(zhì)更容易在柱頂?shù)奶盍仙峡吹健Ｔ谑褂靡欢螘r(shí)間后，新的柱頂填料會(huì)塌陷，使柱效降低，此時(shí)還可補(bǔ)加填料，使柱效恢復(fù)。如 ODS柱，在每次工作結(jié)束后用強(qiáng)力洗脫劑，如 ODS柱，以沖洗到基線(xiàn)平衡。用鹽緩沖液作流動(dòng)相時(shí)，用完后用無(wú)鹽流動(dòng)相沖洗。含有鹵族元素的化合物(氟、氯、)可能對(duì)不銹鋼管道造成腐蝕，不適合長(zhǎng)時(shí)間接觸。HPLC儀柱式安裝如果不經(jīng)常使用，應(yīng)每4-5天開(kāi)一次電源，沖洗15分鐘。

探測(cè)器的維護(hù)1.光源部分探測(cè)器的重要組成部分是光源，光源對(duì)發(fā)射能量有要求，一旦能量衰減到一定程度，就會(huì)出現(xiàn)一系列影響光源使用的問(wèn)題，如基線(xiàn)噪聲變大、靈敏度下降等。一般 UV燈的使用壽命為2000 h，當(dāng)達(dá)到這一時(shí)，我們就特別注意燈的能量狀況，可通過(guò)儀器維護(hù)軟件中自帶的“燈能測(cè)試”功能判斷，測(cè)試結(jié)果將分別評(píng)估低、中、高三個(gè)波長(zhǎng)段的能量，一旦某一波長(zhǎng)段測(cè)試結(jié)果顯示失敗，就表示需要更換燈。2.檢測(cè)池探測(cè)器的另一個(gè)重要組成部分就是檢測(cè)池，也稱(chēng)為循環(huán)池。一般來(lái)說(shuō)，檢測(cè)池是大家比較關(guān)心的問(wèn)題之一，因?yàn)闄z測(cè)池的耐壓能力一般都不高，所以一旦被堵住，很容易造成損壞。實(shí)際上，檢測(cè)池一般不太容易堵塞，因?yàn)閹缀跛械念w粒雜質(zhì)都會(huì)被色譜柱截獲，因此堵塞檢測(cè)器的東西基本不是來(lái)自樣品，很可能是后來(lái)“產(chǎn)生”，例如，含鹽流動(dòng)相殘留在檢測(cè)池中導(dǎo)致鹽析出。六、廢液處理LC廢液中大部分含有，對(duì)人體有一定的危害，對(duì)環(huán)境也會(huì)造成污染，嚴(yán)禁隨意傾倒，應(yīng)及時(shí)處理。當(dāng)前，國(guó)內(nèi)大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都是把廢液運(yùn)往廢液處理站進(jìn)行無(wú)害化處理。

從脫氣機(jī)出來(lái)的流動(dòng)相進(jìn)入高壓泵許多情況下，泵的問(wèn)題都反映在壓力上，壓力波動(dòng)是常見(jiàn)的一類(lèi)問(wèn)題，泵的正常壓力波動(dòng)一般在2%以?xún)?nèi)，這個(gè)異常波動(dòng)通常是由于氣泡和鹽引起的：如果流動(dòng)相中的氣泡沒(méi)有被脫氣機(jī)除掉，那么就會(huì)引起壓力波動(dòng)，通常我們可以通過(guò)重新 purge流和再脫氣流來(lái)解決。由于鹽引起的波動(dòng)，主要是由于流動(dòng)相中添加了濃度較高的緩沖鹽，在含鹽流動(dòng)相和有機(jī)相中，鹽會(huì)發(fā)生微小的析出，從而引起壓力異常波動(dòng)，解決這些問(wèn)題可以考慮適當(dāng)降低鹽的濃度，或者用代替有機(jī)相。若因各種原因必須使用此流動(dòng)相，可考慮在有機(jī)相中加入一定比例的水，然后適當(dāng)提高梯度結(jié)束點(diǎn)。

替代流動(dòng)相的過(guò)程有時(shí)會(huì)發(fā)生在泵的使用過(guò)程中，取代流動(dòng)相是指取代正相溶劑，或反過(guò)來(lái)取代溶劑的過(guò)程，這個(gè)過(guò)程重要的是與流動(dòng)相的兼容性，常用的正反相色譜溶劑是不可互溶的，所以在更換中間，一定要用異沖洗系統(tǒng)，保證管路中所有原有的溶劑都被異取代。流程繼續(xù)進(jìn)行進(jìn)樣，進(jìn)入進(jìn)樣器，進(jìn)樣器分為手動(dòng)和自動(dòng)兩類(lèi)。