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等溫核酸試劑盒
核酸試劑盒的原理
核酸檢測,其實(shí)就是通過檢測熒光信號(hào)的累積來確定樣本中是否有病毒核酸?,F(xiàn)在核酸檢測試劑盒(多重?zé)晒釸T-PCR法),能夠?qū)崿F(xiàn)一小時(shí)快速診斷。
根據(jù)銳科技發(fā)布的文章《如何進(jìn)行核酸檢測帶你揭秘全過程》,目前的病毒核酸檢測試劑盒,多數(shù)采用熒光定量PCR方法。檢測原理是以病毒的基因序列為檢測靶標(biāo),通過PCR擴(kuò)增,使我們的選擇這段靶標(biāo)DNA序列指數(shù)級(jí)增加,每一個(gè)擴(kuò)增出來的DNA序列,都可與我們預(yù)先加入的一段熒光標(biāo)記探針結(jié)合,產(chǎn)生熒光信號(hào),擴(kuò)增出來的靶基因越多,累計(jì)的熒光信號(hào)就越強(qiáng)。
核酸試劑盒
恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)
取代PCR的核酸擴(kuò)增術(shù)﹐
領(lǐng)域:廣泛應(yīng)用于臨床診斷,食品安全檢測,動(dòng)物疾病檢測等領(lǐng)域特點(diǎn):快速,特異,無需專門設(shè)備
類型:1.滾環(huán)核酸擴(kuò)增( rolling circle amolification,RCA)
2.環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增( loop-mediated isothermal amplification,LAMP)3.鏈替代擴(kuò)增( strand displacement amplification)
4.依賴核酸序列擴(kuò)增( nucleicacid sequence based amplification ,NASBA)
5.解鏈酶擴(kuò)增( helix dependent amplification,HAD)
近年來,等溫?cái)U(kuò)增方法的發(fā)展讓基因檢測得以擺脫熱循環(huán)儀器的使用,因此更加便捷化?;诘葴?cái)U(kuò)增方法,多種具有POCT潛力的SARS-CoV-2檢測技術(shù)得以開發(fā)出來。特別是結(jié)合CRISPR技術(shù)后,檢測的特異性和靈敏度得到了進(jìn)一步提升。盡管如此,幾乎所有這些報(bào)道的技術(shù)僅僅證明了其在單基因檢測中的應(yīng)用。然而,臨床認(rèn)可的金標(biāo)準(zhǔn)方法,如RT-qPCR,通常需要檢測兩個(gè)基因。因?yàn)殡p基因檢測能夠有效地避免因基因部分降解,基因拷貝數(shù)差異和擴(kuò)增錯(cuò)誤等引起的潛在假陰性結(jié)果。
目前市場上各家生物企業(yè)研發(fā)出的核酸檢測試劑盒已經(jīng)超過100種,但由于缺乏RNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),無法對(duì)檢測方法進(jìn)行量值傳遞和對(duì)試劑盒檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度進(jìn)行評(píng)價(jià),好的國產(chǎn)試劑盒競爭力也無法得到證明。為此,急需研制RNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來評(píng)價(jià)這些病毒核酸檢測試劑盒的質(zhì)量和準(zhǔn)確度,為試劑盒檢測結(jié)果的判定提供準(zhǔn)繩。