廣州碩譜生物科技有限公司固相萃取柱填料規(guī)格

反相萃取吸附機理。

反相作用機理：

對于通過非極性作用力吸附在非極性SPE柱上的目標(biāo)化合物，可以用具有非極性性質(zhì)的溶劑洗脫，如氯1仿、環(huán)1己烷、乙1酸乙酯等。只要溶劑的洗脫強度足以破壞目標(biāo)化合物與吸附劑非極性官能團之間的范德華力，就可以順利地將目標(biāo)化合物從SPE柱上洗脫下來。即便是極性較強的甲1醇，對于許多化合物來說也具有足夠的非極性作用力將其洗脫。有時單一溶劑不能把疏水性強的目標(biāo)化合物完全洗脫下來，則可考慮使用二氯1甲1烷：乙1酸乙酯（1：1，體積比）。但經(jīng)過思考，這里有幾個問題：一，上一個樣品的目標(biāo)物是否會殘留到下一個樣品，影響本底值。

色譜柱維護-反相柱

樣品

zui好將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫，則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物，zui好使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如果使用強溶劑（例如，流動相為水，樣品溶劑為甲1醇），為達到較好峰形，需要降低進樣量（以250x4.6mm規(guī)格為例，小于10μL）。3、淋洗——用適當(dāng)?shù)娜軇┝芟次絼?，使先前保留的干擾物選擇性的淋洗掉，分離物富集保留在吸附劑上。

固相萃取

固相萃取是一種基于色譜分離的樣品前處理方法，是近年來應(yīng)用zui為廣泛和成熟的樣品前處理方法。固相萃取包括(含有某些官能團的固體吸附劑)和液相(樣品和溶劑)。因為固相萃取吸附劑具有不同的功能基團，所以可以吸附和保留特定化合物于固相萃取柱。

固相萃取按其用途可分為兩種模式。其中， spe柱是典型的固相萃取方式，其主要作用是吸附被稱為目標(biāo)物吸附的化合物；雜質(zhì)吸附式固相萃取是指 spe柱吸附樣品中的雜質(zhì)，目標(biāo)物質(zhì)流穿不保留。

預(yù)柱或保護柱用還是不用的問題！原來分析中藥品種時，我一直都是用保護柱。但來到新公司后，發(fā)現(xiàn)大家都沒有使用，幾個實驗室連保護柱都沒找到一個，也就是說大家從來都沒有用過。后來問一個老員工，說是有可能影響藥品分析。我就想問：安裝保護柱后會影響樣品分析嗎？我們做的大多是頭1孢類的抗1生素。廣州碩譜生物科技有限公司固相萃取柱填料規(guī)格SPE的凈化模式主要取決于填充劑的類型和溶劑的性質(zhì)，有以下2種：模式一：保留目標(biāo)物，去除雜質(zhì)固相萃取操作一般有四步（：1）活化--除去小柱內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境（注意整個過程不要使小柱干涸）。

答：應(yīng)該這樣說，加上保護柱，肯定有利于保護色譜柱不受一些顆粒物質(zhì)的堵塞，肯定有害于分離度和柱效，因為保護柱中間有著死體積的存在但是如果保護柱接得好，并且盡量控制其匹配性和經(jīng)常更換，分離度和柱效應(yīng)該影響并不大。

正相作用機理

常見的極性固定相有：硅膠，氧化鋁，弗羅里硅土及含有氰基（CN）、氨基（NH2）、二醇基（2OH）的鍵合硅膠。

正相模式下，溶劑體系的極性應(yīng)按照樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序逐漸升高，它們的洗脫強度也逐漸增大。必須保證選擇的樣品溶劑不能將目標(biāo)物洗脫，選擇的淋洗液應(yīng)在不洗脫目標(biāo)物的前提下zui大限度地洗脫干擾物，所以洗脫液應(yīng)能恰好完全洗脫目標(biāo)物。在蛋白質(zhì)純化中，C18柱是優(yōu)1秀的除鹽工具，因為樣品中的鹽在C18柱上沒有保留。

上樣

由于樣品基質(zhì)的復(fù)雜性，篩板孔徑在 20um，在上樣之前需要把顆粒物給過濾掉，比如含蛋白的樣品需要加酸、鹽、有機i溶劑、加熱等方式將蛋白處理掉；C18難吸附極性非常強的分子，如碳水化合物(carbohy-drates)。對于一般的基質(zhì)，應(yīng)采用過濾，離心或者高速離心，換大孔徑填料等方式進行處理，現(xiàn)在好多第三方檢測單位樣品量非常多，但是該做的前處理步驟不能省，否則對儀器的損壞，對數(shù)據(jù)的可靠性都會有一定的影響。