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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);將濾膜轉(zhuǎn)到盛有150ml預(yù)雜交液的玻璃中,在適宜溫度(即在水溶液中雜交時(shí)用68℃,而在50%甲酰胺中雜交時(shí)用42℃)下,預(yù)雜交1-2小時(shí)??梢蚤_(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,F(xiàn)ISH)技術(shù)是在已有的性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種非性DNA分子原位雜交技術(shù)。它利用熒光標(biāo)記的核酸片段為探針,與染色體上或DNA顯微切片上的特異fl-N:~行雜交,通過(guò)熒光檢測(cè)系統(tǒng)(熒光顯微鏡)檢測(cè)信號(hào)DNA序列在染色體或DNA顯微切片上的目的DNA序列,進(jìn)而確定其雜交位點(diǎn)。FISH技術(shù)檢測(cè)時(shí)間短,檢測(cè)靈敏度高,無(wú)污染,已廣泛應(yīng)用于染色體的鑒定、基因定位和異常染色體檢測(cè)等領(lǐng)域。FISH是原位雜交技術(shù)大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質(zhì)標(biāo)記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末 被發(fā)明,現(xiàn)已從實(shí)驗(yàn)室逐步進(jìn)入臨床診斷領(lǐng)域。 基本原理是熒光標(biāo)記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復(fù)性;通過(guò)熒光顯微鏡觀察熒光信號(hào)可在不改變被分析對(duì)象(即維持其原位)的前提下對(duì)靶核酸進(jìn)行分析。變性的核酸分子慢慢冷卻,互補(bǔ)的堿基對(duì)之間又會(huì)重新形成雙鏈分子,這一過(guò)程叫作核酸的復(fù)性作用或退火。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);③FISH通過(guò)多次化學(xué)反應(yīng),使雜交信號(hào)增強(qiáng),靈敏度提高,其靈敏度與性探針相當(dāng)??梢蚤_(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
用于原位雜交的探針可以是單鏈或雙鏈DNA,也可以是RNA探針。通常探針操作的長(zhǎng)度以100-400nt為宜,過(guò)長(zhǎng)則雜交率減低。近研究結(jié)果表明,寡核苷酸探針(16-30 nt)能自由出入細(xì)菌和組織細(xì)胞壁,雜交效率明顯高于長(zhǎng)探針,因此,寡核苷酸探針和不對(duì)稱PCR標(biāo)記的小DNA探針或體外轉(zhuǎn)錄標(biāo)記的RNA探針是組織原位雜交優(yōu)選探針。在水產(chǎn)方面,原位雜交技術(shù)則主要應(yīng)用于基因定位(多見(jiàn)于對(duì)魚(yú)類和貝類等水生物的研究)和病毒的檢測(cè)(多見(jiàn)于蝦類)。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);根據(jù)異源單鏈核酸分子間因結(jié)構(gòu)互補(bǔ)發(fā)生共價(jià)鍵結(jié)合,能形成互補(bǔ)雜合雙鏈,而進(jìn)行分子遺傳學(xué)研究的一種技術(shù)??梢蚤_(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
與其他原位雜交技術(shù)相比,熒光原位雜交具有很多優(yōu)點(diǎn),主要體現(xiàn)在:①FISH不需要性同位素標(biāo)記,更經(jīng)濟(jì)安全。②FISH的實(shí)驗(yàn)周期短,探針?lè)€(wěn)定性高,特異性好,定位準(zhǔn)確,能迅速得到結(jié)果。③FISH通過(guò)多次化學(xué)反應(yīng),使雜交信號(hào)增強(qiáng),靈敏度提高,其靈敏度與性探針相當(dāng)。④多色FISH通過(guò)在同一個(gè)核中顯示不同的顏色可同時(shí)檢測(cè)多種序列。⑤既可以在玻片上顯示中期染色體數(shù)量或結(jié)構(gòu)的變化。熒光標(biāo)記探針不對(duì)環(huán)境構(gòu)成污染,靈敏度能得到保障,可進(jìn)行多色觀察分析,因而可同時(shí)使用多個(gè)探針,縮短因單個(gè)探針?lè)珠_(kāi)使用導(dǎo)致的周期過(guò)程和技術(shù)障礙。也可以在懸液中顯示間期染色體DNA的結(jié)構(gòu)。 [1]
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學(xué)或RNA原位雜交。公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。