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蛋白質(zhì)結(jié)晶方法
液-液擴(kuò)散(Liquid–Liquid Diffusion) 這種方法中,蛋白質(zhì)溶液和含有沉淀劑的溶液是彼此分層在一個有小孔的毛細(xì)管中,一個測熔點用的毛細(xì)管一般即可(如圖1.2)。下層是密度大的溶液,例如銨或PEG溶液。如果如MPD被用作沉淀劑,它會在上層。以1:1混合,沉淀劑的濃度應(yīng)該是所期終濃度的二倍。兩種溶液(各自約5μl)通過針頭導(dǎo)入毛細(xì)管,先導(dǎo)入下層的。通過一個簡易的搖擺式離心機(jī)去除氣泡。再加入上層,進(jìn)而兩層之間形成一個明顯的界面,它們會逐漸彼此擴(kuò)散。 Garc′?a-Ruiz and Moreno(1994)已經(jīng)發(fā)展液-液擴(kuò)散技術(shù)至法。蛋白質(zhì)溶液通過毛細(xì)力被吸入狹窄的管中,管的一端是封閉的。接著,開放端入置于小容器的凝膠中,凝膠使得管豎直,蛋白質(zhì)溶液與凝膠接觸。含有沉淀劑的溶液被倒在凝膠上,整個裝置被保存于封閉的盒子以防蒸發(fā)。沉淀劑通過凝膠和毛細(xì)管的擴(kuò)散時間可以由毛細(xì)管插入凝膠的深度控制,從而蛋白質(zhì)溶液中即可形成過飽和區(qū)域,毛細(xì)管底部高而頂部低。這也可作為一個篩選佳結(jié)晶條件的額外信息。
蛋白結(jié)晶板過程實驗
蛋白結(jié)晶板過程是一種重要的分離過程單元操作,由于機(jī)理的復(fù)雜性以及動態(tài)特性使得該過程的數(shù)學(xué)模型研究非常具有挑戰(zhàn)性.本文從間歇結(jié)晶過程建模和動態(tài)模擬,動態(tài)優(yōu)化,模型辨識以及魯棒優(yōu)化與控制等方面,介紹了間歇結(jié)晶過程數(shù)學(xué)模型的研究進(jìn)展,評述了其中的關(guān)鍵問題和求解技術(shù).指出對結(jié)晶過程的機(jī)理進(jìn)一步深入認(rèn)識,開發(fā)數(shù)值穩(wěn)定,精度更高的求解算法是間歇結(jié)晶過程數(shù)學(xué)模型研究的基礎(chǔ).全局優(yōu)化效果較好的進(jìn)化算法和模型預(yù)測控制理論在結(jié)晶過程動態(tài)優(yōu)化和質(zhì)量控制中的應(yīng)用是今后的研究方向。
蛋白結(jié)晶板過程
概括了蛋白質(zhì)結(jié)晶的基本過程,闡述了蛋白質(zhì)結(jié)晶的早期發(fā)展歷程,重點介紹了蛋白質(zhì)結(jié)晶的近期研究狀況,主要包括:形核機(jī)理的研究,結(jié)晶條件的篩選和結(jié)晶技術(shù)的優(yōu)化以及基于結(jié)構(gòu)的設(shè)計技術(shù).特別是對離子液體在蛋白質(zhì)結(jié)晶過程中的應(yīng)用及發(fā)展前景進(jìn)行了討論,
論述了國內(nèi)外生物大分子(蛋白質(zhì),酶等)沉淀結(jié)晶的研究現(xiàn)狀和進(jìn)展,著重從結(jié)晶熱力學(xué),粒子聚集,結(jié)晶的成核與晶體生長,以及場的作用等方面闡述了蛋白質(zhì)沉淀結(jié)晶過程的特定現(xiàn)象與可能的結(jié)晶機(jī)理,對蛋白質(zhì)的沉淀結(jié)晶過程作了的描述,并提出未來研究方向,為蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析,新藥設(shè)計,生化研究以及工業(yè)化生產(chǎn)提供一定的基礎(chǔ)。
蛋白結(jié)晶板使用
在基因組、蛋白質(zhì)組、納米技術(shù)中,結(jié)晶學(xué)是一門關(guān)鍵的科學(xué)。在這些研究領(lǐng)域中,通過X射線進(jìn)行單晶結(jié)構(gòu)分析來探測分子的三維結(jié)構(gòu)是很重要的技術(shù)。其中大分子晶體研究是主要的挑戰(zhàn),GREINER生產(chǎn)一系列的產(chǎn)品來滿足這一應(yīng)用。
有一平臺,平臺中有一個方形平底的結(jié)晶池,用于接收樣品,
每池容量3.9μl池底透明。
標(biāo)準(zhǔn)形板,方形池:96孔,方形孔,孔容量320μl,孔底磨砂不透明.每一孔中設(shè)計
有一平臺,平臺中有三個方形平底的結(jié)晶池,用于接收樣品,每池
容量4.1μl,池底透明.
標(biāo)準(zhǔn)形板,圓形池:96孔,方形孔,孔容量320μl,孔底磨砂不透明.每一孔中設(shè)計有一
平臺,平臺中有三個圓形U底的結(jié)晶池,用于接收樣品,每池容量