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美國Synthecon3D細(xì)胞培養(yǎng)灌入式RCCS-RCMW三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)灌入 式 培養(yǎng)系統(tǒng)
該 系統(tǒng)可以從外部培養(yǎng)瓶不間斷的給 細(xì)胞室 供給養(yǎng)分。細(xì)胞通過分子量 截留膜 保留于細(xì)胞室。連續(xù)養(yǎng)分 供給 并 檢測 pH 值,氧和葡萄糖水平培養(yǎng)基通過一個軟管泵連續(xù)的流經(jīng)旋轉(zhuǎn)細(xì)胞培養(yǎng)皿以及外部硅膠氧合器.培養(yǎng)基可以交換,取樣,或在停止以及不停止培養(yǎng)皿旋轉(zhuǎn)的情況下改動。該系統(tǒng)可以 通過用戶安裝的內(nèi)置傳感器來監(jiān)測內(nèi)部的 pH 值,氧氣和葡萄糖水平。旋轉(zhuǎn)灌入 式RCMW 由一個單轉(zhuǎn)頭基座,電源和操作手冊組成??梢詳U展到 培養(yǎng) 更大的移植組織。
培養(yǎng)容器應(yīng)該以什么速度旋轉(zhuǎn)?
這取決于細(xì)胞聚合體的直徑。當(dāng)容器轉(zhuǎn)動時,細(xì)胞聚合體加速,直到他們到達(dá)沉積速度,而該速度取決于細(xì)胞聚合體的大小。根據(jù)斯托克斯方程,沉降速率隨著細(xì)胞聚合體半徑的平方而增加。因此,隨著聚合體體積上的增加,它們沉降的更迅速,同時為了防止細(xì)胞聚合體與培養(yǎng)壁的碰撞有必要增加旋轉(zhuǎn)速度。因此,一開始可能以慢速旋轉(zhuǎn)培養(yǎng),例如7rpm,當(dāng)細(xì)胞聚合體在體積上增長并且變得可見,再增加旋轉(zhuǎn)的速度。
RCCS三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的應(yīng)用?
1取材 在無菌環(huán)境下從機體取出某種組織細(xì)胞(視實驗?zāi)康亩ǎ?,?jīng)過一定的處理(如消化分散細(xì)胞、分離等)后接入培養(yǎng)器血中,這一過程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴大培養(yǎng)則無取材這一過程。機體取出的組織細(xì)胞的首1次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。2培養(yǎng) 將取得的組織細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。3凍存及復(fù)蘇(可參閱后面有關(guān)章節(jié))為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度-196℃,將細(xì)胞收集至凍存管中加入含保護劑(一般為二甲亞砜或甘油)的培養(yǎng)基,以一定的冷卻速度凍存,終保存于液氮中。在極低的溫度下,細(xì)胞保存的時間幾乎是無限的。復(fù)蘇一般采用快融方法,即從液氮中取出凍存管后,立即放入37℃水中,使之在一分鐘內(nèi)迅速融解。然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)。