大腸菌群檢驗方法

國家標準采用三步法，即：乳糖發(fā)酵試驗、分離培養(yǎng)和證實試驗?！　∪樘前l(fā)酵試驗：樣品稀釋后，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。36±1℃培養(yǎng)48±2h，觀察是否產(chǎn)氣。

　　分離培養(yǎng)：將產(chǎn)氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于伊紅美藍瓊脂平板上，36±1℃培養(yǎng)18-24h，觀察菌落形態(tài)。

　　證實試驗：挑取平板上的ke疑菌落，進行革蘭氏染色觀察。同時接種乳糖發(fā)酵管36±1℃培養(yǎng)24±2h，觀察產(chǎn)氣情況。

　　報告：根據(jù)證實為大腸桿菌陽性的管數(shù)，查MPN表，報告每100ml（g）大腸菌群的MPN值。

酶底物（英語：substrate）在生物化學領(lǐng)域指參與生化反應(yīng)的物質(zhì)，可為化學元素、分子或化合物，經(jīng)酶作用可形成產(chǎn)物，一個生化反應(yīng)的底物往往同時也是另一個化學反應(yīng)的產(chǎn)物。

酶底物法采用 onPG 和 MUG 兩種營養(yǎng)指示劑，這兩種試劑分別可以被大腸菌群的 β-半乳糖苷酶和大腸桿菌的 β-葡糖醛酸酶分解代謝。當大腸菌群在酶底物檢測試劑中生長時，其使用 β-半乳糖苷酶分解代謝 ONPG，并使樣品從無色變?yōu)辄S色。大腸桿菌使用 β-葡糖醛酸酶分解代謝 MUG 時，能夠發(fā)出熒光。

水的大腸菌群數(shù)是指100 mL水檢樣內(nèi)含有的大腸菌群實際數(shù)值，以大腸菌群近似數(shù)(MPN)表示。在正常情況下，腸道中主要有大腸菌群、糞鏈球菌和厭氧芽孢桿菌等多種細菌 。這些細菌都可以隨人畜排泄物進入水源，由于大腸菌群在腸道內(nèi)數(shù)量多，所以，水源中大腸菌群的數(shù)量，是直接反映水源被人畜排泄物污染的一項重要指標。

同一批產(chǎn)品，檢測的兩份結(jié)果不一樣，是不是那里出問題？答：其實不是出問題，這個是正常的，同一批產(chǎn)品不代表他們的微生物檢測結(jié)果是一模一樣的，如果是這樣也沒必要做五份去驗證產(chǎn)品合格了吧？如果說同一份樣品（制成一份樣）出現(xiàn)結(jié)果差好遠的話，這里就要去分析那里出問題。

大腸桿菌是寄生在任何許多動物體內(nèi)，主要是腸道內(nèi)的細菌，并且可以致病，因此有必要做好大腸桿菌檢測。大腸桿菌對人和動物有病原性，尤其對嬰兒和幼畜（禽），常引起嚴重腹瀉和bai血癥，它是一種普通的原核生物，根據(jù)不同的生物學特性將致病性大腸桿菌分為6類：腸致病性大腸桿菌（EPEC）、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌（ETEC）、腸侵襲性大腸桿菌（EIEC）、腸chu血性大腸桿菌（EHEC）、腸黏附性大腸桿菌（EAEC）和彌散粘附性大腸桿菌(DAEC).。大腸桿菌屬于革蘭氏陰性細菌（G-）。