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DNA連接酶不需要模板,因?yàn)镈NA連接酶是將DNA雙鏈上的兩個(gè)缺口同時(shí)連接起來。用DNA連接酶連接具互補(bǔ)粘性末端的DNA1片段或是用T4DNA連接酶直接將平末端的DNA1片段連接起來。
DNA聚合酶是以一條DNA鏈為模板,將單個(gè)核苷酸通過磷酸二酯鍵形成一條與模板鏈互補(bǔ)的DNA鏈。DNA聚合酶的結(jié)構(gòu)是三磷酸腺苷。
激酶、磷酸酶、磷酸化酶的區(qū)別?
激酶催化磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移反應(yīng),比如己糖激酶。
磷酸酶催化磷酸基團(tuán)的水解,與激酶正好相反。
磷酸化酶催化磷酸解反應(yīng),比如糖原磷酸化酶,催化糖原生成磷酸葡萄糖。這其實(shí)是磷酸解,要是水解就生成葡萄糖了。當(dāng)然一般習(xí)慣上還是說水解。
激酶催化的反應(yīng)一般也叫磷酸化,這沒什么錯(cuò)誤,只是和磷酸化酶容易混淆。堿性磷酸酶
人體在懷孕,以及骨骼成長(zhǎng)中遭受某種類型損傷后會(huì)將堿性磷酸酶釋放進(jìn)血流。堿性磷酸酶是一種由肝1臟產(chǎn)生的蛋白質(zhì)并可以在所有人體器1官中發(fā)現(xiàn)它。在兒童和青少年的骨骼成長(zhǎng)過程中,骨頭中的磷酸酶數(shù)量相對(duì)較高。醫(yī)生能通過血檢了解堿性磷酸酶,如果水平過高就說明存在一些健康問題。然而,堿性磷酸酶只是幫助醫(yī)生找出潛在原因的其中一個(gè)指數(shù)。
DNA copy主要的特點(diǎn)是半保留copy、半不連續(xù)copy。在copy過程中,原來雙螺旋的兩條鏈并沒有被破壞,它們分成單獨(dú)的鏈,每一條舊鏈作為模板再合成一條新鏈,這樣在新合成的兩個(gè)DNA分子中,一條鏈?zhǔn)桥f的而另外一條鏈?zhǔn)切碌?,因此這種copy方式被稱為半保留copy。
DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?,一條是 5'→3'方向,另一條是 3'→5'方向。在copy起點(diǎn)處,兩條鏈解開形成copy泡(replication bubble ), DNA向兩側(cè)copy形成兩個(gè)copy叉(replication fork)。隨著DNA的不斷解旋,兩條鏈變成單鏈形式,可以作為模板合成新的互補(bǔ)鏈。但是,生物細(xì)胞內(nèi)所有的DNA聚合酶都只 能催化 5'→3'延伸。因此,以3 '→5'的鏈為模板鏈時(shí),DNA聚合酶可以沿 5'→3'的方向合成互補(bǔ)的新鏈,這條鏈稱為前導(dǎo)鏈(leading strand )。當(dāng)以另一條鏈為模板時(shí)則不能連續(xù)合成新鏈,這條鏈稱為滯后鏈(lagging strand )。這時(shí),DNA聚合酶從copy叉的位置開始向遠(yuǎn)離copy叉的方向合成1?2 kb的新鏈片段,待copy叉向前移動(dòng)相應(yīng)的距離后,又重復(fù)這一過程,合成另一個(gè)類似大小的新鏈片段,這些片段被稱為岡崎片段(Okazaki fragment)。zui后,由另一種DNA聚合酶和DNA連接酶負(fù)責(zé)把這些岡崎片段之間的RNA引物除去,并把缺口補(bǔ)平,使岡崎片段連成完整的DNA鏈。這種前導(dǎo)鏈的連續(xù)copy和滯后鏈的不連續(xù)copy在生物細(xì)胞中是普遍存在的,稱為DNA的半不連續(xù)copy。