植物細(xì)胞培養(yǎng)

⑴光照：離體培養(yǎng)的植物細(xì)胞對光照條件不甚嚴(yán)格，因?yàn)榧?xì)胞生長所需要的物質(zhì)主要是靠培養(yǎng)基供給的。但光照不但與光合作用有關(guān)，而且與細(xì)胞分化有關(guān)，例如光周期可對性細(xì)胞分化和開花調(diào)控作用，所以以獲得植株為目的的早期植物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，光照條件特別重要。以植物細(xì)胞離體培養(yǎng)方式獲得重要物質(zhì)，如medicine的過程，植物細(xì)胞大多是在反應(yīng)器中懸浮培養(yǎng)。

⑵激1素：植物細(xì)胞的分裂和生長特別需要植物激1素的調(diào)節(jié)，促進(jìn)生長的生長素和促進(jìn)細(xì)胞分裂的分裂素是基本的激1素。植物細(xì)胞的分裂，生長，分化和個(gè)體生長周期都有相應(yīng)的激1素參與調(diào)節(jié)。和動物細(xì)胞相比，植物細(xì)胞離體培養(yǎng)對激1素要求的原理已經(jīng)了解，其應(yīng)用技術(shù)也已相當(dāng)成熟，已經(jīng)有一套能使用的培養(yǎng)液。同時(shí)解決了植物細(xì)胞對水、營養(yǎng)物、激1素、滲透壓、酸堿度、微量元素等的需求。

細(xì)胞的多能性受到轉(zhuǎn)錄因子網(wǎng)絡(luò)和表觀遺傳學(xué)的復(fù)雜調(diào)控，那么，僅僅依靠導(dǎo)人的幾個(gè)轉(zhuǎn)錄因子是如何完成這一復(fù)雜的任務(wù)，從而誘導(dǎo)出具有多能性的細(xì)胞呢?深入研究體細(xì)胞重編程的分子機(jī)制，調(diào)控機(jī)制以及體外定向誘導(dǎo)分化機(jī)制也是未來研究的重要任務(wù)之一。

1，逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒載體導(dǎo)致tumour發(fā)生的潛在風(fēng)險(xiǎn)需要加以有效防范。

2，需要深入研究比較iPS細(xì)胞和hES細(xì)胞在細(xì)胞生物學(xué)的特性、 定向分化機(jī)制等方面是否具有顯著的差異。

3，需建立一種新的方法以避免基因轉(zhuǎn)染或基因轉(zhuǎn)導(dǎo)帶來的潛在風(fēng)險(xiǎn), 如通過某些化學(xué)物品或因子喚醒體細(xì)胞中固有的上述轉(zhuǎn)錄因子的方式以替換外源性基因轉(zhuǎn)染的方式, 或者用某些因子的短暫性表達(dá)代替永1久性導(dǎo)入。

iPS細(xì)胞與胚胎ES形態(tài)相似、核型、端粒酶活性、體外分化潛能均相同，同時(shí)也能夠表達(dá)相同的表面標(biāo)志分子。ES細(xì)胞和IPS細(xì)胞具有相同的基因。不同的是，ES細(xì)胞中的與細(xì)胞多能性有關(guān)的基因能夠表達(dá)，如：oct4，Sox2等。而已分化的體細(xì)胞中的這些基因不能表達(dá)。通過導(dǎo)入與多能性有關(guān)的外源基因來喚醒體細(xì)胞中的多能性基因，從而使體細(xì)胞從分化狀態(tài)重編程為多能性iPS細(xì)胞。