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小分子類物質(zhì)包含多肽、天然小分子、化學合成小分子等一系列的物質(zhì),被廣泛用于medicine等各個領(lǐng)域。以往小分子的定量檢測主要通過氣相和液相色譜完成,存在周期長,檢測儀器價格昂貴等多方面的不足。那么immune檢測技術(shù)可以用于定量檢測小分子嗎?
免1疫檢測試劑盒的技術(shù)基礎(chǔ)就是抗原和抗1體的特異性結(jié)合,小分子特異性抗1體的制備即是小分子immune檢測試劑盒制備的關(guān)鍵之處。小分子由于分子量小,結(jié)構(gòu)簡單,在免1疫學上劃歸為半抗原(Hapten),即只有immune反應(yīng)性而沒有immune原性的一類物質(zhì),不能直接刺激機體產(chǎn)生antibody但是卻擁有和antibody結(jié)合的特性。隨著抗1體制備技術(shù)的發(fā)展,小分子特異性抗1體的制備技術(shù)顯得更為多元化
甘油三酯(TG)檢測試劑盒(比色法),#KTB2200:用異丙1醇抽提取TG,KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸,Periodic acid氧化甘油生成甲醛,在氯離子存在下甲醛與Acetylacetone縮合生成黃色物質(zhì),在420 nm有特征吸收峰,其顏色的深淺與TG含量成正比。該試劑盒提供了一種簡單的檢測方法檢測動物組織、細胞、serum(漿)以及植物樣本中甘油三酯(TG)的含量水平;而且細致優(yōu)化了樣本處理方法、實驗操作流程以及結(jié)果計算過程。
游離膽固醇(FC)檢測試劑盒(比色法),#KTB2210:膽固醇氧化酶催化游離膽固醇(FC)生成△4-膽甾烯酮和H2O2,過氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物,在500 nm有吸收峰,其顏色深淺與FC含量成正比。該試劑盒提供了一種簡單的檢測方法檢測生物樣本如動物組織、細胞(細菌)、serum(漿)中游離膽固醇(FC)的含量水平;而且細致優(yōu)化了樣本處理方法、實驗操作流程以及結(jié)果計算過程。
水中微生物DNA提取試劑盒,樣本制備步驟。
步驟1. 樣本過濾
1.1 從試劑盒中小心取出濾膜。用水樣潤濕濾膜。
1.2 將濾膜放置在濾器中,并過濾必要體積的水樣。
步驟2. 菌體裂解
* 提前準備:預(yù)先將恒溫儀設(shè)置到70℃,將恒溫箱設(shè)置到37℃。
2.1將樣本過濾后的濾膜翻轉(zhuǎn)放置到試劑盒提供的IncubationDish(平皿)中。
2.2 吸取2mllysis buffer(裂解液),并加到濾膜上。
2.3 將濾膜浸泡在裂解液中,小心搖勻平皿并在37°C孵育30分鐘。
2.4 用平皿中的裂解液沖洗濾膜,并搖晃平皿10秒鐘。
2.5 將平皿中的400μl裂解液轉(zhuǎn)移至IncubationTube(孵育管),70°C孵育10分鐘。
2.6 樣本短暫離心,并加入400μl Binding Buffer(結(jié)合液),立即渦旋充分混勻,以防止DNA沉淀。請勿離心樣本,并立即進行下一步。
步驟3. DNA提取
3.1 將步驟2.6中的混合液(~800μl)轉(zhuǎn)移到CollectionTube(收集管)內(nèi)的SpinColumn(離心柱)中,小心液體不要沾到離心柱的邊緣。
3.2 離心柱離心≥10000× g,1分鐘。棄掉收集管中的液體。重新將離心柱插到原有的收集管中。
3.3 離心柱中加入500μl洗液1。離心≥10000×g,1分鐘。棄掉收集管中的液體。重新將離心柱插到原有的收集管中。
3.4 離心柱中加入500μl洗液2。離心≥10000×g,1分鐘。棄掉收集管中的液體。將離心柱插到一個新的收集管中。
3.5 zui大速度離心3分鐘,以去除殘留的洗液2。
3.6 棄掉收集管。
3.7 吸取60μl已70℃預(yù)熱的洗脫液,直接加到離心柱的硅膠膜上。硅膠膜表面應(yīng)全部覆蓋洗脫液。
3.8 室溫靜置2分鐘,然后離心8000×g,2分鐘,以洗脫DNA。
3.9 樣本保存管中的洗脫液即包含DNA,可直接用于PCR,或儲存在2~8℃,可存放1周。長期儲存是在≤-18℃。