蛋白表達(dá)科學(xué)研究

rBPI56或其功能性氨基端片段通常在真核細(xì)胞中表達(dá)，將有助于獲得具有生物學(xué)活性抗G菌重組蛋白。但因該種表達(dá)方式存在成本高、表達(dá)量低等問(wèn)題而影響其實(shí)際應(yīng)用。用原核細(xì)胞表達(dá)BPI23-Fcγ1重組蛋白   。

Profinity eXact融合標(biāo)簽表達(dá)系統(tǒng)：利用bio-rad rofinity eXact 系統(tǒng)制備無(wú)標(biāo)簽、N 端無(wú)任何其它殘基 的重組蛋白只需大約1 小時(shí)。該親和介質(zhì)較為穩(wěn)定，可多次用于目的蛋白的純化，從而節(jié)約了 成本。適用于純化以不溶的聚集體形式存在的重組蛋白。Profinity eXact 融合標(biāo)簽系統(tǒng)的有效性和一致性將使其成為獲得高產(chǎn)率無(wú)標(biāo)簽重組蛋白的通用平臺(tái)。

多個(gè)蛋白質(zhì)可以一起，往往是通過(guò)結(jié)合在一起形成穩(wěn)定的蛋白質(zhì)復(fù)合物，折疊或螺旋構(gòu)成一定的空間結(jié)構(gòu)，從而發(fā)揮某一特定功能。合成多肽的細(xì)胞器是細(xì)胞質(zhì)中糙面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體。蛋白質(zhì)的不同在于其氨基酸的種類(lèi)、數(shù)目、排列順序和肽鏈空間結(jié)構(gòu)的不同。食入的蛋白質(zhì)在體內(nèi)經(jīng)過(guò)消化被水解成氨基酸被吸收后，合成人體所需蛋白質(zhì)，同時(shí)新的蛋白質(zhì)又在不斷代謝與分解，時(shí)刻處于動(dòng)態(tài)平衡中。因此，食物蛋白質(zhì)的質(zhì)和量、各種氨基酸的比例，關(guān)系到人體蛋白質(zhì)合成的量，尤其是青少年的生長(zhǎng)發(fā)育、孕產(chǎn)婦的優(yōu)生優(yōu)育、老年人的健康長(zhǎng)壽，都與膳食中蛋白質(zhì)的量有著密切的關(guān)系。蛋白質(zhì)又分為完全蛋白質(zhì)和不完全蛋白質(zhì)。缺乏必需氨基酸或者含量很少的蛋白質(zhì)稱(chēng)不完全蛋白質(zhì)，如谷、麥類(lèi)、玉米所含的蛋白質(zhì)和動(dòng)物皮骨中的明膠等。



整體結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)是以氨基酸為基本單位構(gòu)成的生物高分子。蛋白質(zhì)分子上氨基酸的序列和由此形成的立體結(jié)構(gòu)構(gòu)成了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的多樣性。蛋白質(zhì)具有一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)結(jié)構(gòu)，蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)決定了它的功能。一級(jí)結(jié)構(gòu)（primary structure）：氨基酸殘基在蛋白質(zhì)肽鏈中的排列順序稱(chēng)為蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)，每種蛋白質(zhì)都有而確切的氨基酸序列。二級(jí)結(jié)構(gòu)（secondary structure）：蛋白質(zhì)分子中肽鏈并非直鏈狀，而是按一定的規(guī)律卷曲（如α-螺旋結(jié)構(gòu)）或折疊（如β-折疊結(jié)構(gòu)）形成特定的空間結(jié)構(gòu)，這是蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)主要依靠肽鏈中氨基酸殘基亞氨基（-NH-）上的氫原子和羰基上的氧原子之間形成的氫鍵而實(shí)現(xiàn)的。三級(jí)結(jié)構(gòu)（tertiary structure）：在二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，肽鏈還按照一定的空間結(jié)構(gòu)進(jìn)一步形成更復(fù)雜的三級(jí)結(jié)構(gòu)。肌紅蛋白，血紅蛋白等正是通過(guò)這種結(jié)構(gòu)使其表面的空穴恰好容納一個(gè)血紅素分子。四級(jí)結(jié)構(gòu)（quaternary structure）：具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈按一定空間排列方式結(jié)合在一起形成的聚集體結(jié)構(gòu)稱(chēng)為蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)。如血紅蛋白由4個(gè)具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈構(gòu)成，其中兩個(gè)是α-鏈，另兩個(gè)是β-鏈，其四級(jí)結(jié)構(gòu)近似橢球形狀。