基因的分子手術是相當復雜的過程，其中zui重要的是連接酶

互補堿基之間的配對，形成雙鏈。并在DNA連接酶的作用下，使同一DNA分子的兩端連接成環(huán)狀，或使兩個分子連成一大的線狀分子。不同限制性內切酶切割DNA產生的三種不同類型的末端。

基因的分子手術是相當復雜的過程，除了需要限制性內切酶外，還需要其他- -些工具酶包括連接酶、DNA 聚合酶、RNA聚合酶、核酸酶、末端修飾酶等，對DNA或RNA進行各種各樣的修飾。其中zui重要的是連接酶。

堿性磷酸酶

人體在懷孕，以及骨骼成長中遭受某種類型損傷后會將堿性磷酸酶釋放進血流。堿性磷酸酶是一種由肝1臟產生的蛋白質并可以在所有人體器1官中發(fā)現(xiàn)它。在兒童和青少年的骨骼成長過程中，骨頭中的磷酸酶數量相對較高。醫(yī)生能通過血檢了解堿性磷酸酶，如果水平過高就說明存在一些健康問題。然而，堿性磷酸酶只是幫助醫(yī)生找出潛在原因的其中一個指數。

cDNA是指具有與某RNA鏈呈互補堿基序列的DNA。與RNA鏈互補的單鏈DNA，以其RNA為模板，在適當引物的存在下，由依賴RNA的DNA聚合酶（反轉錄酶）作用而合成，并且在合成單鏈cDNA后，再用堿處理除去與其對應的RNA以后，以單鏈cDNA為模板，由依賴DNA的DNA聚合酶或依賴RNA的DNA聚合酶作用合成雙鏈cDNA。在這種情況下，mRNA的cDNA，與原來的基因組DNA相同而且無內含子；相反地，對應于在原來基因中沒有的而在mRNA存在的3'末端的poly A序列等的核苷序列上，與外顯子序列、先導序列以及后續(xù)序列等一起反映出mRNA結構。
置換合成法。該方法利用鏈在反轉錄酶作用下產生的DNA RNA雜交鏈不用堿變性，而是在dNTP存在下。利用RNA酶H在雜交鏈的mRNA鏈上造成切口和缺口。從而產生一系列RNA引物，使之成為合成第二鏈的引物。在大腸DNA聚合酶工的作用下合成第二鏈。該反應有3個主要優(yōu)點：①非常有效；②直接利用鏈反應產物，無須進一步處理和純化；③不必使用S1核酸酶來切割雙鏈cDNA中的單鏈發(fā)夾環(huán)。