典型的腺病毒載體系統(tǒng)如：穿梭質(zhì)粒pCA13/腺病毒基因組質(zhì)粒pBHG11/包裝細(xì)胞293細(xì)胞。pCA13/的HCMV IE啟動(dòng)子－多克1隆位點(diǎn)－SV40 AN（poly A）構(gòu)成外源基因的表達(dá)盒，該表達(dá)盒的插入使腺病毒E1基因缺失，但是保留其兩端側(cè)翼序列（左側(cè)的1~3bp的ITR，右側(cè)從3.5kb到末端的維持病毒裝配和活力必須的蛋白IX的基因），也保留了腺病毒的包裝信號(hào)

φ（194~358bp）；pBHG11則保留了腺病毒基因組的絕大部分，但是缺失了包裝信號(hào)φ、0.5~3.7圖距（mu）部分的E1區(qū)、77.5～86.2mu的E3區(qū)，293細(xì)胞是整合有Ad5 E1基因的人胚shen細(xì)胞系。pBHG11因?yàn)槿笔Оb信號(hào)及E1區(qū)而不能copy，pCA13帶有包裝信號(hào)及E1的側(cè)翼序列，但是缺失E1區(qū)及腺病毒絕大部分基因組，同樣不能copy。外源目的基因插入pCA13后，與pBHG11共轉(zhuǎn)染，進(jìn)入293細(xì)胞。pCA13與pBHG11在細(xì)胞內(nèi)發(fā)生同源重組，同時(shí)，293細(xì)胞提供E1蛋白，從而包裝產(chǎn)生腺病毒顆粒。該病毒的蛋白質(zhì)外殼同野1生型腺病毒相似，具有同樣的感1染力進(jìn)入靶1細(xì)胞的能力，但是基因組DNA的E1區(qū)被外源目的基因取代，即進(jìn)入靶1細(xì)胞后病毒不能copy，但可以表達(dá)目的蛋白。

第yi代腺病毒載體：一般將E1或E3基因缺失的腺病毒載體稱為第yi代腺病毒載體，此類型載體在未經(jīng)過純化時(shí)可引發(fā)機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的炎1癥反應(yīng)和免1疫反應(yīng)，純化后可以安全使用，體內(nèi)表達(dá)周期可達(dá)4周。

第二代腺病毒載體：E2A或E4基因缺失的腺病毒載體被稱為第二代腺病毒載體，產(chǎn)生的免1疫反應(yīng)較弱其載體容量和安全性方面有所改進(jìn)，但病毒包裝難度和出毒和病毒滴度下降厲害，應(yīng)用相當(dāng)局限。

第三代腺病毒載體：第三代載體缺失了全部的（無病毒載體，gutless vector）或大部分腺病毒基因（微型腺病毒載體，mini Ad），僅可保留ITR和包裝信號(hào)序列。第三代腺病毒載體zui大可插入35kb的基因，病毒蛋白表達(dá)引起的細(xì)胞免1疫反應(yīng)進(jìn)一步減少，載體中引入核基質(zhì)附著區(qū)基因可使得外源基因保持長(zhǎng)期表達(dá)，并增加了載體的穩(wěn)定性。這一載體系統(tǒng)需要一個(gè)腺病毒突變體作為輔助病毒。

基因?qū)爰?xì)胞常用方法

　　 噬菌體進(jìn)入宿主細(xì)菌，病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞中繁殖就是感1染（infection）。用經(jīng)人工改造的噬菌體活病毒作載體，以其DNA與目的序列重組后，在體外用噬菌體或病毒的外殼蛋白將重組DNA包裝成有活力的噬菌體或病毒，就能以infection的方式進(jìn)入宿主細(xì)菌或細(xì)胞，使目的序列得以copy繁殖。infection的效率很高，但DNA包裝成噬菌體或病毒的操作較麻煩?！?br />

啟動(dòng)子：RNA聚合酶特異性識(shí)別結(jié)合和啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的DNA序列。有方向性，位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游。上游啟動(dòng)子元件：TATA盒上游的一些特定DNA序列，反式作用因子可與這些元件結(jié)合，調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄效率。反應(yīng)元件：與被的信息分子受體結(jié)合，并能調(diào)控基因表達(dá)的特異DNA序列。增強(qiáng)子：與反式作用因子結(jié)合，增強(qiáng)轉(zhuǎn)錄活性，在基因任意位置都有效，無方向性。沉默子：基因表達(dá)負(fù)調(diào)控元件，與反式作用因子結(jié)合，抑制轉(zhuǎn)錄活性。Poly(A)加尾信號(hào)：結(jié)構(gòu)基因末端保守的AAUAAA順序及下游GT或T富含區(qū)，被多聚腺苷酸化特異因子識(shí)別，在mRNA 3′端加約200個(gè)A。（2）反式作用因子：能識(shí)別和結(jié)合特定的順式作用元件,并影響基因轉(zhuǎn)錄的一類蛋白質(zhì)或RNA。