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PCR實(shí)驗(yàn)室試劑的操作：

⑴所用的所有溶液都應(yīng)該沒有核酸和（或）核酸酶（DNase和RNase）污染。

⑵所有PCR試劑中使用的水都應(yīng)該是高質(zhì)量的－新鮮蒸餾的去離子水，用0.22μm過濾的，并且是高壓滅菌。

⑶在20℃到25℃貯存的試劑建議加點(diǎn)像疊氮鈉一類的抗微生物劑，在擴(kuò)增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴(kuò)增反應(yīng)。⑷所用試劑都應(yīng)該以大體積配制，實(shí)驗(yàn)一下看試劑是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量進(jìn)行貯存。

⑸所有試劑和樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。

⑹新配制的試劑在用于準(zhǔn)備新的標(biāo)本之前應(yīng)該加以檢驗(yàn)。

⑺樣品準(zhǔn)備和前PCR區(qū)所使用的移液管在不使用時(shí)都應(yīng)該小心保存。

在前PCR區(qū)建立PCR混合物：

⑴可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分裝并保存在-20℃或4℃，在實(shí)驗(yàn)室只涉及到擴(kuò)增一種或少數(shù)幾種特異序列時(shí)這樣做很有用。

⑵如果你的實(shí)驗(yàn)室使用多套引物，以致于配制包括所有試劑的單一反應(yīng)混合物不夠經(jīng)濟(jì)，可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。

⑶作為一個(gè)規(guī)則，應(yīng)該保存一套陰性、弱陽性和強(qiáng)陽性對(duì)照樣品來分析樣品配制和PCR前過程的效率和潔凈程度。而且，你也希望通過使用一個(gè)已知的弱陽性樣品來驗(yàn)證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴(kuò)增抑制物。

⑷陰性樣品要與每組樣品同時(shí)做，以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產(chǎn)物的污染，陰性對(duì)照應(yīng)該包括核酸以外的所有試劑。

⑸當(dāng)做陽性對(duì)照時(shí)，有兩個(gè)理由決定了應(yīng)該使用很少數(shù)量的核酸。

⑹由于必須有對(duì)照反應(yīng)，對(duì)照模板的特點(diǎn)應(yīng)該予以考慮。

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凈化實(shí)驗(yàn)室除了解決空氣凈化的問題以外，還要盡可能多的為實(shí)驗(yàn)工作提供方便，因此在設(shè)計(jì)上應(yīng)考慮一些必備的實(shí)驗(yàn)室用器具。

1、互鎖式傳遞窗：在P2實(shí)驗(yàn)室配有兩個(gè)傳遞窗。保證了實(shí)驗(yàn)室物流的安全性?；ユi式傳遞窗內(nèi)有紫外線燈,當(dāng)污染過物品拿出實(shí)驗(yàn)室前進(jìn)行消毒.互鎖式傳遞窗還保證了室外和室內(nèi)空氣的隔絕,方便了實(shí)驗(yàn)人員的物品傳遞,減少了實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室的次數(shù).傳遞窗室內(nèi)室外都可控制。

2、自動(dòng)閉門器：根據(jù)國家規(guī)范要求，在潔凈實(shí)驗(yàn)室門上安裝有自動(dòng)閉門器。

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在PCR實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行過程中，工作人員不可避免地會(huì)遇到一些緊急情況，因此在實(shí)驗(yàn)室建設(shè)期間，安全問題應(yīng)該是首位的。PCR實(shí)驗(yàn)室的安全設(shè)備：原子吸收罩

主體采用不銹鋼制成，配有電動(dòng)調(diào)節(jié)系統(tǒng)控制風(fēng)量，排氣性能穩(wěn)定，耐腐蝕性強(qiáng)，常用于實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)。