親和柱的應(yīng)用

應(yīng)用：牛奶中M1的測定

（參考方法GB 541337-2010 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 乳和乳制品中M1 的測定）

樣品前處理

稱取50g牛奶到具塞離心管中，在水浴中加熱到35-37℃，4000轉(zhuǎn)離心15min，除去上層乳脂，全部樣品待過柱凈化

樣品過柱凈化

1. 將親和柱（SBHL-20-0245）連接于10ml或50ml注射管下。

2. 將處理好的樣品全部通過親和柱，控制試樣以2mL/min-3mL/min穩(wěn)定的流速過柱。（注意：空氣不能通過柱體）

3. 以穩(wěn)定的流速淋洗柱子兩次，棄去全部流出液，并使2mL-3mL空氣通過柱體。

4. 洗脫，流速為1mL/min-2mL/min，收集全部洗脫液于玻璃試管中，供檢測用。

親和柱適用注意事項(xiàng)

(1) 嘔吐毒素對(duì)人體有害，應(yīng)戴手套操作。凡接觸到標(biāo)樣的玻璃器皿都要用5%次酸鈉浸泡過夜。

(2) 不要使用過有效期的親和柱。

(3) 親和柱應(yīng)在2~8℃保存。不要冷凍。

(4) 使用前，親和柱需至少提前半小時(shí)回溫至室溫(25℃左右)。

(5) HPLC液相測定值、試劑盒計(jì)算值接近zui高檢出值時(shí)，樣本的實(shí)際含量可能大于柱容量而造成流穿，建議減少上樣體積重新過柱。

(6) 稱取的樣品量以及提取液的體積可根據(jù)實(shí)際情況按比例調(diào)整，建議不少于10g樣。

親和柱親和層析技術(shù)原理

IAC也是色譜技術(shù)的一種,可稱為色譜技術(shù),是一種利用抗原特異性可逆結(jié)合特性的SPE技術(shù),根據(jù)抗原的高選擇性,從復(fù)雜的待測樣品中提取目標(biāo)化合物。主要原理是將與惰性微珠共價(jià)結(jié)合,然后裝柱,將抗原溶液過親和柱,而非目標(biāo)化合物則沿柱流下,然后用洗脫緩沖液洗脫抗原,從而得到純化的抗原,用適當(dāng)?shù)木彌_液和合適的保存方法,柱可以再生備用。其提純效率很高,通常只需一次就可達(dá)到1000～10000倍的純化效果(王澤永,2002)。