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PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局(一級(jí)屏障)
整個(gè)平面布局完全能夠滿足國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)及標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所要求,而且充分利用了實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所劃分的建筑空間,按照實(shí)驗(yàn)室操作程序的要求配備了各種功能的房間,操作路線方便快捷,每間實(shí)驗(yàn)室的平面尺寸都是按照各種實(shí)驗(yàn)功能分配的。
設(shè)計(jì)上將實(shí)驗(yàn)室主體框架為彩鋼板玻璃隔斷,顏色為啞白色,彩鋼厚度每面0.426mm,彩鋼巖棉夾芯板防火等級(jí)為不燃燒;聚苯y(tǒng)u烯彩鋼夾芯板防火等級(jí)為阻止燃燒。隔斷玻璃厚度為5mm;為防止沉積灰塵窗料使用R25mm鋁合金圓弧壓線;所有二維連接處的內(nèi)側(cè)均使用R50mm鋁合金內(nèi)圓角,暴露在外的二維連接線的外側(cè)則用R100mm鋁合金外圓角連接;彩鋼板的三維連接處使用三維接點(diǎn)過渡,而彩鋼板與墻面地面則用鋁合金槽鋁聯(lián)接。吊頂材料亦為彩鋼板。
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PCR標(biāo)本制備區(qū)
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為樣本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定DNA的合成。
本區(qū)的壓力梯度要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎海员苊鈴泥徑鼌^(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染,所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)。
擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為DNA擴(kuò)增。此外,已制備的DNA模板 (來自樣本制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。
本區(qū)的壓力梯度要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動(dòng)。個(gè)別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。
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PCR實(shí)驗(yàn)室各區(qū)域儀器設(shè)備配備通常如下:
1、標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室試劑準(zhǔn)備區(qū): 儀器設(shè)備主要應(yīng)有加樣器、冰箱、天平、低速離心機(jī)、混勻器、可移動(dòng)紫外燈等。可使用超凈工作臺(tái)作為試劑配制操作臺(tái)面。
2、標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本制備區(qū)儀器設(shè)備主要應(yīng)有生物安全柜(為B2, 可避免提取核酸在柜內(nèi)反復(fù)循環(huán),造成標(biāo)本間交叉“污染”,出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。
此外還應(yīng)配備加樣器、臺(tái)式高速離心機(jī)(冷凍及常溫)、臺(tái)式低速離心機(jī)、恒溫設(shè)備(水浴和干浴儀)、冰箱、混勻器和可移動(dòng)紫外燈等。