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博日食品加工廠核酸提取純化信賴推薦

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發(fā)布時間:2020-10-16 13:56  






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PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。但在實際的PCR反應(yīng)過程中,隨著反應(yīng)的進行由于體系中各成分的消耗(主要是由于聚合酶活力的衰減)使得靶序列并非按指數(shù)方式擴增,而是按線性的方式增長進入平臺期。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開始時, 探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。

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實時熒光定量PCR的出現(xiàn),極大地簡化了定量檢測的過程,而且真正實現(xiàn)了絕i對定量。多種檢測系統(tǒng)的出現(xiàn),使實驗的選擇性更強。廣州勱博--病毒核酸提取系統(tǒng)銷售一個豬場對進場人員的衣物進行熏蒸消毒,專門制作了一個消毒柜,但由于開始設(shè)計不理想,消毒柜太大,無法進入屋內(nèi),就放在了舍外。自動化操作提高了工作效率,反應(yīng)快速、重復(fù)性好、靈敏度高、特異性強、結(jié)果清晰。隨著生物芯片技術(shù)和熒光探針定量技術(shù)的結(jié)合,熒光定量PCR在醫(yī)學(xué)檢測及其他各個領(lǐng)域中的應(yīng)用前景將更加廣闊,令人欣喜。盡管如此我們也應(yīng)清晰認(rèn)識到,F(xiàn)Q-PCR技術(shù)在我國各個研究領(lǐng)域的應(yīng)用并不多見,這就需要我國學(xué)者迎頭趕上,使FQ-PCR技術(shù)更充分地i推廣,以推動研究工作的快速發(fā)展。


廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務(wù)包括:非洲病毒檢測、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測、非洲檢測、全自動核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測試劑盒。符合要求的檢測方法及檢測試劑盒(試紙條)可從中國動物疫病預(yù)防控制中心網(wǎng)站查詢。我們的客戶對象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場、養(yǎng)豬場、屠宰場、生豬屠宰場。

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一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。生豬屠宰廠(場)連接著生豬產(chǎn)銷等上下游環(huán)節(jié),便于“順藤摸瓜”及時發(fā)現(xiàn)和追溯潛在風(fēng)險。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋, 無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值.

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什么是熒光定量PCR?常規(guī)PCR中,擴增產(chǎn)物(擴增子)是通過終點法來分析檢測,即PCR反應(yīng)結(jié)束后,DNA通過瓊脂糖凝膠電泳,然后進行成像分析。而熒光定量PCR可以在反應(yīng)進行過程中進行累積擴增產(chǎn)物的分析和檢測,即“實時”。屠宰廠(場)生產(chǎn)設(shè)施設(shè)備和環(huán)境一旦被污染,病毒更易長期存活,更易在生豬和豬肉產(chǎn)品中循環(huán)擴增,成為病毒的“儲存器”“擴增器”。在反應(yīng)體系中加入熒光分子,通過熒光信號的按比例增加來反應(yīng)DNA量的增加,使PCR產(chǎn)物的實時檢測成為可能。滿足實驗?zāi)康牡臒晒饣瘜W(xué)物質(zhì)包括DNA結(jié)合染料和熒光標(biāo)記的序列特異引物或探針;專門的熱循環(huán)儀配備熒光檢測模塊,用于監(jiān)測擴增時的熒光,檢測到的熒光信號反映了每個循環(huán)擴增產(chǎn)物的量。


廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務(wù)包括:非洲病毒檢測、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測、非洲檢測、全自動核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測試劑盒。在real-timeQ-PCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的監(jiān)測和連續(xù)地分析擴增相關(guān)的熒光信號,隨著反應(yīng)時間的進行,監(jiān)測到的熒光信號的變化可以繪制成一條曲線。我們的客戶對象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場、養(yǎng)豬場、屠宰場、生豬屠宰場。

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FQ-PCR在醫(yī)學(xué)栓測中有價值的應(yīng)用領(lǐng)城就是對感i染性疾病的診斷,只要有限的核酸序列清楚,運用FQ-PCR技術(shù),檢測任何病原體。但在許多情況下,研究者們已不再滿足于得知某一特異DNA序列的存在與否,他們更著眼于對其進行精i確的核酸定量。目前,對一些培養(yǎng)周期長或缺乏穩(wěn)定可靠的檢測手段的病原體,可以考慮用FQ-PCR檢測,為臨床診斷提供依據(jù)FQ-PCR對病原體的檢測克服了免i疫學(xué)檢測的“窗口期“問題,可判斷疾病是否隱性或亞臨床狀態(tài)。FQ-PCR技術(shù)可以應(yīng)用于腫癟的研究及診斷。

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實時熒光定量PCR的基本原理:理論上,PCR過程是按照2n(n代表PCR循環(huán)的次數(shù))指數(shù)的方式進行模板的擴增。上機器前最i好離心一下,讓貼在管壁上的液體流下來同時也消掉氣泡。但在實際的PCR反應(yīng)過程中,隨著反應(yīng)的進行由于體系中各成分的消耗(主要是由于聚合酶活力的衰減)使得靶序列并非按指數(shù)方式擴增,而是按線性的方式增長進入平臺期。因此在起始模板量與終點的熒光信號強度間沒有可靠的相關(guān)性。如采用常規(guī)的終點檢測法(利用EB染色來判斷擴增產(chǎn)物的多少,從而間接的判斷起始拷貝量),即使起始模板量相同經(jīng)PCR擴增、EB染色后也完全有可能得到不同的終點熒光信號強度。



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非洲(African Swine fever,ASF)是由非洲病毒(African Swine fever virus,ASFV)感i染家豬和各種(非洲、歐洲等)引起一種急性、出i血性、烈性傳i染病。短距離可經(jīng)空氣傳播、污染的飼料、泔水、剩菜及肉屑、欄舍、車輛、器具和衣服等均可間接傳播本病。世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為法定報告動物疫病,該病也是我范的一類動物疫情。其特征是發(fā)病過程短,急性和急性i感i染死i亡率高達100%,臨床表現(xiàn)為發(fā)熱(達40~42℃),心跳加快,呼吸困難,部分咳嗽,眼、鼻有漿液性或粘液性膿性分泌物,皮膚發(fā)紺,淋巴i結(jié)、、胃腸粘膜明顯出血,非洲臨床癥狀與癥狀相似,只能依靠實驗室監(jiān)測確診。

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非洲是一種傳i染性強,危害嚴(yán)重的豬感i染病毒性疾病。非洲病毒(ASFV)通過直接或間接接觸傳播,在豬群眾傳播速度極快。廣州勱博--食品加工企業(yè)/公司/廠核酸提取純化生豬屠宰企業(yè)作為產(chǎn)業(yè)鏈條上的重要主體,防控動物疫病、保證產(chǎn)品質(zhì)量安全是應(yīng)盡的責(zé)任。而且,該病毒在未經(jīng)烹飪的生豬相關(guān)制品中存活時間很長,這一特點使得非洲容易向未感i染區(qū)域傳播。由于非洲可以感i染,而軟蜱通過叮咬成為非洲主要傳播途徑之一,這也給非洲的凈化帶來難度。非洲的感i染致死率極高,接近100%,并且目前沒有有效的疫i苗和治i療手段。PCR技術(shù)在傳i染病診斷上具有廣泛的應(yīng)用,該技術(shù)靈敏度高,特異性強,能夠在豬、豬產(chǎn)品及環(huán)境中病毒的“蹤跡”進行有效的監(jiān)控,是農(nóng)業(yè)農(nóng)村部指i定的非洲首i選診斷技術(shù)。


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